猪链球菌9型毒力株GZ0565的耐药特性及其5’核苷酸酶破坏宿主免疫防御的机制

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摘要

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第一章猪链球菌的耐药特性

1猪链球菌及其危害

2 SS9的研究进展

3猪链球菌的耐药性研究

3．1四环素类药物耐药机制

3．2大环内酯类药物耐药机制

3．3万古霉素类药物耐药机制

第二章猪链球菌破坏宿主免疫防御机制

1．2参与免疫调节的作用

2猪溶血素的抗吞噬作用

3溶菌酶释放蛋白的抗吞噬作用

4免疫球蛋白酶协助细菌免疫逃逸

5核酸酶和核苷酸酶协助细菌逃避宿主中性粒细胞外陷阱

第三章SS9毒力株GZ0565的耐药特性

1材料与方法

1．1菌株、质粒和培养条件

1．2主要试剂和仪器

1．3 GZ0565的全基因组测序

1．4 GZ0565的多位点序列分型(MLST)分析

1．6无乳链球菌vanZSS背景株的构建

1．7几种抗生素对无乳链球菌MIC的测定

1．8 SS vanZSS无痕缺失株的构建

1．9替考拉宁对不同猪链球菌菌株MIC的测定

2结果

2．1 GZ0565全基因组测序

2．2 GZ0565属于ST243

2．3 GZ0565对四环素红霉素产生极强耐药作用，对常用抗生素敏感

2．5 GZ0565 vanZSS无痕缺失株的构建和鉴定

2．6 VanZss不介导GZ0565对替考拉宁的耐药作用

3讨论

第四章5’核苷酸酶破坏宿主免疫防御的机制

1材料与方法

1．1菌株、质粒及培养条件

1．2主要仪器与试剂

1．3 tNT及Groel蛋白的纯化

1．4NT酶活性测定

1．5小鼠血液腺苷(Ado)和脱氧腺苷(dAdo)的测定

1．6 RAW264．7细胞的活力检测

1．7 RAW264．7细胞DNA损伤的测定

1．8 Western Blot试验

1．9小鼠血液单核细胞数量的测定

1．10 小鼠血液白细胞的转录组分析

1．11 实时荧光定量PCR

2结果

2．1 NT分解dAMP产生dAdo

2．2 NT可以分解dNMP

2．3 SS NT可在小鼠血液内产生Ado和dAdo

2．4 NT引起RAW264．7细胞以caspase-3依赖性方式引发DNA损伤

2．5 NT引起小鼠血液内单核细胞减少

2．6 WT和Δnt感染后的小鼠血液转录组分析

3讨论

参考文献

全文总结

硕士期间发表及待发表论文

致谢