鸡传染性贫血及四种免疫抑制病PCR诊断方法的建立与应用

摘要

鸡传染性贫血(chickeninfectiousanemia，CIA)是由鸡传染性贫血病毒(chickeninfectiousanemiavirus，CIAV)引起的传染病，其主要危害是直接损害鸡的造血器官和淋巴组织，从而引起免疫抑制，使鸡对其它病原的易感性增加，导致患病鸡群的发病和死亡，造成严重的直接或间接经济损失。CIAV基因组编码三种蛋白，其中VP3蛋白(又称凋亡素)是目前已知的该病毒的唯一致病因子。因此，本研究根据CIAV基因组的特点，参照有关资料，合成了一对扩增整个VP3基因及部分VP1、VP2基因序列的引物，建立了用于CIA临床诊断的PCR方法，并应用该方法对安徽省该病的流行病学进行研究，为准确而详实地掌握该病对安徽省养鸡业的危害情况、分子流行病学及制定有效的疾病防制措施提供理论依据和技术支持。同时在此基础上建立了能同时诊断鸡传染性贫血(chickeninfectiousanemia，CIA)、马立克氏病(Marek'sdisease，MD)、网状内皮增生症(Reticuloendotheliosis，RE)、禽白血病(Avianleucosis，AL)等四种病毒性免疫抑制病的多重PCR方法，并将所建立的方法直接用于临床上这四种免疫抑制病的诊断、流行病学及混合感染情况调查等的研究。 通过对常规DNA抽提方法进行改进，使整个诊断过程由原先的需时8个小时以上缩短为在5个小时内完成，使该法具有快速、特异、敏感等优点，能很好地满足临床快速诊断的需要。 应用本课题所建立的PCR诊断方法，对2003年9月～2005年3月期间来自安徽省65个鸡群的185个病例共986份组织样品进行了CIAV的检测，并对病例的主要临床特征进行调查记录。CIAV检测的结果表明，该病毒已在安徽省鸡群中普遍存在，平均阳性率为25.95％；对不同品种、不同日龄鸡的检测结果表明，各种品种、不同日龄鸡均可感染CIAV，其中以三黄鸡阳性率最高；30日龄以内鸡只的发病率较高；不同器官的检测表明，骨髓的检出率最高。 应用本课题所建立的多重PCR方法，对所收集的病例同时进行CIAV、MDV、REV和ALV等四种免疫抑制性病毒的检测，同时参照相关文献进行了传染性法氏囊病病毒(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)的检测。结果鸡群中多种免疫抑制性病毒混合感染的现象已很普遍，CIAV与MDV、REV、ALV和IBDV二重或多重感染率达22.32％。 调查结果证实，免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在，并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。

目录

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文献综述

引言

1材料与方法

2结果

3 讨论

结论

参考文献

致谢

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