鸡传染性贫血病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

摘要

为研究一种可同时检测鸡传染性贫血病毒(CIAV)和鸡细小病毒(ChPV)的双重PCR方法,本试验根据GenBank中CIAV的VP基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为219 bp和384 bp的特异性引物,通过对反应条件的优化,特异性和敏感性试验,建立和评价双重PCR检测方法.结果 显示,该方法最佳引物比例为CIAV上下游引物各0.4 μL(20.μmoL/L),ChPV上下游引物各0.6μL(20 μmol/L);最佳退火温度为56.1°C;灵敏度可达到66 fg(CIAV)和78 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性.结果 表明,本试验所建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定等优点和优势,可用于同时快速鉴别诊断CIAV和ChPV的混合感染.