量子点聚合体在蛋白质定量检测及超高分辨率定位研究中的应用

摘要

量子点（Quantum Dot,QD）是一种半导体纳米发光材料。与传统有机荧光染料相比，量子点具有吸收光谱宽、发射光谱窄、量子产率高、抗漂白性能强等诸多特点，在化学分析、生物传感、分子影像等领域得到了广泛应用。本论文以单分子宽场显微技术为手段，研究量子点聚合体在蛋白质定量检测及超高分辨率定位上的应用。具体内容如下：　　1、量子点团聚体聚合度的测量。以单个量子点光谱成像法，监测量子点团聚物的光漂白和光谱蓝移过程，根据量子点光谱蓝移与漂白的不同步性，计量团聚体中量子点的个数。量子点团聚体由QD-Biotin和链酶亲和素特异性结合而成。当链酶亲和素的浓度在0nM–25nM时，量子点团聚体的平均聚合度随其浓度的增加而线性增大。　　2、量子点聚合度的影响因素及聚合度在蛋白质定量检测中的应用。探讨了蛋白质浓度、离子强度、缓冲液pH值、反应温度、反应时间等因素对量子点团聚程度的影响。在条件优化的基础上，以生物素化的抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ-Biotin）为例，考察了量子点团聚物聚合度与其浓度的关系，依此建立了生物素化蛋白质的全新定量方法。　　3、量子点聚合体的超高分辨率定位及影响因素研究。考察了量子点超分辨定位准确性的影响因素，如曝光时间、增益、外力等。根据量子点的眨眼及光谱蓝移现象，对衍射极限范围内的量子点团聚体中的多个量子点分别超定位，初步研究了量子点聚合体中量子点间的相互关系。

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1 绪论

1.1 引言

1.2 量子点的研究概述

1.3 远场超高分辨率的荧光成像

1.4 本论文的构想与展望

2 量子点团聚物聚合度的测量

2.1 引言

2.2 实验部分

2.3 结果与讨论

2.4 小结

3 量子点聚合度的影响因素及聚合度在蛋白质定量研究中的应用

3.1 引言

3.2 实验部分

3.3数据分析

3.4 实验结果与讨论

3.5 小结

4 量子点聚合体的超高分辨率定位及影响因素研究

4.1 引言

4.2 实验部分

4.3 数据分析

4.4 实验结果与讨论

4.5小结

5 结论

参考文献

附录 A 插值拟合荧光光斑等高图及中心定位

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