孕酮受体基因、类固醇21-羟化酶基因多态性及其与绵羊产羔数关系

摘要

本论文以孕酮受体(progesterone receptor， PGR)基因和类固醇21-羟化酶(steroid21-hydroxylase)基因为研究对象，旨在探索这两个基因的多态性与绵羊高繁殖力之间的关系。
　　 用于本研究的高繁殖力绵羊羊品种、中等繁殖力绵羊羊品种以及低繁殖力绵羊羊品种分别来自于山东省嘉祥种羊场、浙江省余杭湖羊场和北京高特牧业有限公司种羊场，其中小尾寒羊205只，湖羊49只，多赛特绵羊和特克赛尔绵羊分别40只。利用PCR单链构象多态性(PCR Single-Strand Conformation Polymorphism， PCR-SSCP)分析、限制性内切酶酶切、基因克隆等技术研究这些基因在遗传变异及其对绵羊繁殖性能的影响。结果表明：
　　 (1)对于PGR基因，根据牛的孕酮受体基因设计15对引物覆盖该基因全部9个外显子，检测PGR基因在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊）、中等繁殖力品种（湖羊）和低繁殖力品种（多赛特绵羊和特克赛尔绵羊）的单核苷酸多态性，同时研究该基因对绵羊繁殖力的影响。检测结果显示只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增片段，在小尾寒羊、湖羊和多赛特中均检测到AA、AG和GG型，在特克塞尔中只检测到AA和AG型。测序表明GG型与AA型相比在217bp处有一单碱基突变(A→G)，但未引起氨基酸变化。GG型和AG型小尾寒羊产羔数均值分别比AA型的多0.97只(P＜0.05)和0.64只(P＜0.05)，GG型和AG型小尾寒羊产羔数差异不显著（P＞0.05）。
　　 (2)对于CYP-21基因，针对该基因的10个外显子设计了10对引物中，仅引物P8扩增片段存在多态性。对于P8的扩增片段，HinP I1酶切在小尾寒羊、湖羊和多赛特中检测到AA和AB型，在特克塞尔中只检测到AA型；BcnI酶切在小尾寒羊、湖羊、多赛特和特克塞尔中均检测到CC和CD型。测序分析发现AB型与AA型相比在2340位发生了A-→G突变，未引起氨基酸改变；CD型与CC型相比在2376位发生了G→A突变，未引起氨基酸改变。AB型小尾寒羊产羔数最小二乘均值比AA型的多0.96只(P＜0.05)，CC型和CD型小尾寒羊产羔数差异不显著(P＞0.05)。研究结果初步表明PGR基因和CYP21基因皆是提高绵羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。