宣木瓜果实中主要生理活性物质提取分离研究

摘要

宣木瓜果实营养丰富，具有极高的食用价值和营养保健作用，但由于其酸涩味极少鲜食，目前主要有宣木瓜酒、果醋、果脯、蜜饯等传统食品，利用率不高。
　　 本研究以宣木瓜果实为原料，探讨主要生理活性物质成分提取、分离、纯化的最佳工艺；并对宣木瓜中木瓜蛋白酶和超氧化物歧化酶(SOD)进行活性及提取分离研究。目的在于：为齐墩果酸(OA)的工业化生产提供理论基础；综合利用宣木瓜资源提供理论和实际应用依据，促进宣木瓜产业发展、增加果农收入等方面具有积极意义。
　　 本研究结果如下：
　　 1．宣木瓜果实中主要营养成分：总糖2.62％、还原糖1.35％、有机酸2.42％、果胶0.89％、单宁2.21％、粗纤维1.12％、蛋白质1.36％、熊果酸0.11％、齐墩果酸0.20％，总黄酮0.15％，木瓜蛋白酶的活力为600.72U，SOD的酶活为1460.00U。
　　 2．最佳提取工艺：分别采用回流提取法、微波辅助萃取法、超声波辅助萃取法、冷浸法和索氏抽提法对宣木瓜果实中活性物质进行提取，并优化提取工艺，得出各提取法的最佳工艺参数，以提取得率和目的物纯度为指标，经过对比这五种提取方法的最佳工艺的提取效果，结果表明：五种提取法中得出超声波辅助提取法提取效率较高，效果较好，以目的物纯度为考查对象的超声波辅助提取法最佳工艺组合定为A2B1C1D1，即95％乙醇，提取时间10min，提取功率200W，提取温度60℃，提取一次。
　　 3．通过对同一组样品液分别进行分光光度法和HPLC法检测的比较，结果表明，分光光度法容易受样品液中其他显色物质的影响，检测值偏高，HPLC法不易受其他杂质的影响，精确度较高。
　　 4．高效液相色谱法的建立：采用PhenomenexC18色谱柱(250mm×4.6mmi．d．，5μm)，流动相为V（甲醇）：V（磷酸水溶液，pH=2.0）=85：15，柱温27℃，流速0.8mL/min，进样量5μL，检测波长210nm。结果表明：该方法操作简便，精密度高，重复性好，为宣木瓜中齐墩果酸的含量测定提供可靠的科学研究依据。
　　 5．齐墩果酸的纯化：分别用酸碱沉降法、氯仿萃取法和大孔树脂层析分离法分离纯化OA，三种分离纯化方法得到的目的物的纯度分别为：41.02％、57.08％和70.56％。
　　 6、宣木瓜果实中木瓜蛋白酶的活性：完熟的宣木瓜果实中木瓜蛋白酶的活力最高，为600.72U。
　　 7．宣木瓜果实中SOD的活性：SOD的酶活为1460.00U，比活力为2.08U/mg。