载盐霉素的高密度脂蛋白的制备及体外抗卵巢癌活性研究

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英文缩略词表

第1 章 绪论

1.1 卵巢癌简介

1.2 高密度脂蛋白

1.2.1 高密度脂蛋白的成分

1.2.2 高密度脂蛋白主要载脂蛋白的功能

1.2.3 高密度脂蛋白的功能和应用

1.2.4 重组人高密度脂蛋白

1.3 盐霉素

1.3.1 盐霉素抗癌作用机制

1.3.2 盐霉素的毒副作用

1.4 立题依据

第2 章 材料与试剂

2.1 实验材料

2.1.1 细胞系

2.1.2 实验仪器

2.1.3 主要试剂

2.2 主要溶液及配制

2.2.1 磷酸盐缓冲液（PBS）的配制

2.2.2 胰酶-EDTA 储备液配制（10×）

2.2.3 RPMI 1640 培养液配制

2.2.4 DMEM 高糖培养液配制

2.2.5 TBST 配制

2.2.6 电泳液配制

2.2.7 电转液配制

2.2.8 封闭液配制

第3 章 实验方法

3.1 卵巢癌细胞的培养

3.1.1 卵巢癌细胞的传代

3.1.2 卵巢癌细胞的冻存

3.1.3 卵巢癌细胞的复苏

3.2 载盐霉素高密度脂蛋白纳米粒的制备

3.2.1 盐霉素HPLC 定量方法的建立

3.2.2 包封率及载药量的测定

3.2.3 S-HDL 纳米粒处方的优化

3.2.4 载盐霉素高密度脂蛋白纳米粒的制备

3.2.5 透射电镜观察S-HDL 的形态

3.3 S-HDL对卵巢癌细胞增殖的影响

3.3.1 不同剂量S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 增殖的抑制作用

3.3.2 S-HDL 不同作用时间对卵巢癌细胞系A2780 增殖的抑制作用

3.3.3 不同剂量S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 增殖的抑制作用

3.3.4 S-HDL 不同作用时间对卵巢癌细胞系SKOV3 增殖的抑制作用

3.4 S-HDL对卵巢癌细胞迁移的影响

3.4.1 S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 迁移的影响

3.4.2 S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 迁移的影响

3.5 S-HDL对卵巢癌细胞侵袭能力的影响

3.5.1 S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 侵袭能力的影响

3.5.2 S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 侵袭能力的影响

3.6 Annexin V-FITC/PI法检测卵巢癌细胞系A2780 凋亡

3.7 Western-blot 分析S-HDL 对卵巢癌细胞凋亡相关蛋白表达的影响

3.7.1 准备细胞样品

3.7.2 提取蛋白

3.7.3 蛋白浓度定量

3.7.4 SDS-PAGE 分析

3.7.5 转膜

3.7.6 杂交

3.7.7 显色

第4 章 实验结果

4.1 载盐霉素高密度脂蛋白纳米粒的制备

4.1.1 盐霉素HPLC 定量方法的建立

4.1.2 S-HDL 纳米粒配方的优化

4.1.3 透射电镜观察S-HDL 的形态

4.2 S-HDL对卵巢癌细胞增殖的影响

4.2.1 S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 增殖的影响

4.2.2 S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 增殖的影响

4.3 S-HDL对卵巢癌细胞迁移能力的影响

4.3.1 S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 迁移能力的影响

4.3.2 S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 迁移能力的影响

4.4 S-HDL对卵巢癌细胞侵袭能力的影响

4.4.1 S-HDL 对卵巢癌细胞系A2780 侵袭能力的影响

4.4.2 S-HDL 对卵巢癌细胞系SKOV3 侵袭能力的影响

4.5 Annexin V-FITC/PI法检测卵巢癌细胞凋亡

4.6 Western blot 分析

第5章 讨论

第6章 结论

参考文献

作者简介及攻读学位期间发表研究成果

致谢