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引 言
第1 章 文献综述
1.1 糖尿病视网膜病变的研究现状
1.1.1 糖尿病视网膜病变
1.1.2 自噬在糖尿病视网膜病变中的作用
1.1.3 AMPK/mTOR 信号通路在自噬中的作用
1.1.4 糖尿病视网膜病变的治疗现状
1.2 黄连素的研究现状
1.2.1 黄连素对糖尿病及其并发症的治疗作用
1.2.2 黄连素与自噬的关系
1.2.3 黄连素对AMPK/mTOR 信号通路的作用
第2 章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 药品与试剂
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要溶液配制
2.2 实验方法
2.2.1 细胞的培养
2.2.2 MTT 实验
2.2.3 建立高糖诱导的661W细胞、RPE 细胞损伤模型
2.2.4 确定黄连素的安全浓度范围确定
2.2.5 筛选黄连素的最适保护浓度
2.2.6 细胞转染
2.2.7 Hoechst 33258 染色
2.2.8 MDC染色
2.2.9 蛋白提取
2.2.10 BCA蛋白定量
2.2.11 Western blot
2.1.12 统计学分析
第3 章 实验结果
3.1.1 高糖对视锥细胞及色素上皮细胞损伤模型条件筛选
3.1.2AMPK siRNA 对视锥细胞及色素上皮细胞转染效率检测
3.1.3 高糖通过抑制AMPK导致视锥细胞及色素上皮细胞凋亡水平增加
3.1.4 高糖通过抑制AMPK对视锥细胞及色素上皮细胞凋亡相关蛋白的影响
3.1.5 高糖通过抑制AMPK导致视锥细胞及色素上皮细胞自噬水平下降
3.1.6 高糖通过抑制AMPK对视锥细胞及色素上皮细胞自噬相关蛋白的影响
3.1.7 高糖通过抑制视锥细胞及色素上皮细胞AMPK上调mTOR 的表达
3.2 明确黄连素通过调节AMPK/mTOR通路改善高糖诱导的视锥细胞及色素上皮细胞损伤
3.2.1 黄连素对高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞损伤的保护作用
3.2.2 黄连素通过激活AMPK抑制高糖诱导的视锥细胞及色素上皮细胞凋亡
3.2.3 黄连素对高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞凋亡相关蛋白的影响
3.2.4 黄连素通过激活AMPK促进高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞自噬
3.2.5 黄连素对高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞自噬相关蛋白的影响
3.2.6 黄连素通过激活AMPK抑制高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞mTOR的表达
第4 章 讨论
4.1 探讨AMPK/mTOR通路异常在高糖诱导视锥细胞及色素上皮细胞损伤中的作用
4.2 明确黄连素通过调节AMPK/mTOR通路改善高糖诱导的视锥细胞及色素上皮细胞损伤
第5 章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致 谢
吉林大学;
