利用酿酒酵母生物合成白藜芦醇途径的构建及优化

目录

声明

第1章绪论

1.2合成生物学的研究进展

1.2.2 国内研究进展

1.3 合成生物学在天然产物类化合物中的应用

1.4天然产物白藜芦醇

1.4.2 白藜芦醇的生物活性

1.4.3 白藜芦醇的合成

1.5 本论文研究思路及意义

第2章异源白藜芦醇合成途径的构建

2.1 实验材料

2.1.3 培养基及主要溶液

2.1.4主要仪器

2.2 实验方法

2.2.2 克隆载体的构建

2.2.3 酿酒酵母表达载体的构建

2.2.4 酵母转化子的诱导

2.2.5酵母转化子发酵与发酵参数检测方法的建立

2.3 实验结果与讨论

2.3.3酿酒酵母表达载体的构建

2.3.4酿酒酵母转化子的构建及验证

2.3.5 酵母转化子的诱导

2.3.6酵母转化子发酵与检测方法的建立

2.3.7摇瓶发酵结果

2.4 本章小结

第3章酵母工程菌发酵条件的探索优化

3.1.3培养基及主要溶液

3.2 实验方法

3 .2.2三缺酵母工程菌的发酵与流加补料

3.3.1三缺、二缺酵母工程菌的发酵与固体补料结果

3.3.2三缺酵母工程菌的发酵与流加补料结果

3.3.3三缺酵母工程菌的发酵罐发酵结果

3.4 本章小结

第4章酵母基因组的改造

4.1.3 培养基及主要溶液

4.2 实验方法

4.2.1 CRISPR-Cas9敲除citl基因

4.2.2 三缺酵母工程菌Acitl和二缺酵母工程菌△citl的构建

4.3.2酵母转化子构建结果

4.3.3发酵结果

4.4 本章小结

第五章 应用于文库筛选的工具酵母荧光菌株的构建

5.1.3培养基及主要溶液

5.2 实验方法

5 .2.1 工具酵母荧光载体pESC-TRP-4CLI-STS-EGFP的构建

5 .2.2三种酵母荧光工程菌的构建

5 .2.3 三种酵母荧光工程菌基准荧光值检测

5.3.2 Gibson组装工具酵母荧光载体的验证结果

5.3.3酵母荧光工程菌的构建结果

5.3.4 荧光基准值的建立

5.4 本章小结

第6章结论与展望

6.2展望

参考文献

作者简介及在学期间所取得的科研成果

致谢