洛克沙胂对鸡急性和亚急性毒性评价的实验研究

摘要

洛克沙胂被用作畜禽的饲料添加剂，在促生长、抗球虫和抗菌等方面应用广泛，但由于洛克沙胂在畜禽饲养过程中的不合理滥用，导致畜禽猪、鸡等的中毒，其残留危害动物性食品安全。
　　 本实验以洛克沙胂为研究对象，选择罗曼蛋鸡为动物模型，通过急性、亚急性毒性实验及组织病理变化、血液抗氧化指标、热休克蛋白表达水平的检测，从细胞和分子水平了解洛克沙胂对鸡的中毒作用，为饲料中添加剂的研究提供理论依据。
　　 1、洛克沙胂对鸡LD50的测定
　　 选择7日龄健康罗曼蛋鸡，一次性给各组鸡灌胃洛克沙胂分别100、150、250、300mg/kg，观察鸡死亡情况，以确定最大最小致死剂量；按简化寇氏法计算其等比级数为1.3，确定急性毒性实验各组剂量分别为100、130、169、220、286mg/kg，按照各组剂量给各组鸡一次性灌服。
　　 结果显示：洛克沙胂对鸡致死剂量范围在100-250mg/kg内。急性毒性实验测得洛克沙胂对鸡LD50为138.04mg/kg体重，LD50的标准误为0.026，LD50的95％可信限为123.03～158.49m/kg体重。
　　 2、洛克沙胂对鸡的临床症状及组织的影响
　　 选择7日龄健康罗曼蛋鸡，随机分为4组，每组各40只。根据LD50和日均采食量设计各实验组洛克沙胂剂量，按照0mg/kg(Ⅰ)、50mg/kg(Ⅱ)、110mg/kg(Ⅲ)和170mg/kg(Ⅳ)剂量组，拌料，饲喂42d。每周周末称体重并统计采食量，测定洛克沙胂对鸡体重的影响，观察临床变化并制作石蜡切片进行组织病理学观察，产生相应的病理变化。
　　 结果显示：170mg/kg组洛克沙胂长期应用会造成鸡采食量、体重的降低，便秘、腹泻等症状。110mg/kg(Ⅲ)和170mg/kg(Ⅳ)组的肝脏有明显的炎性细胞浸润，包括淋巴细胞和巨噬细胞。50mg/kg(Ⅱ)、110mg/kg(Ⅲ)和170mg/kg(Ⅳ)的肾脏的肾小管上皮细胞颗粒变性并伴有纤维变化，肾小球萎缩。
　　 3、洛克沙胂对鸡抗氧化物及热休克蛋白表达水平的影响
　　 通过洛克沙胂拌料饲喂，进行亚急性毒性实验的研究，同步开展对抗氧化物及热休克蛋白的研究，测定血清中抗氧化物-超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽抗氧化酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化物-丙二醛(MDA)含量。提取肝组织mRNA，反转录成cDNA，引物HSP70：上游：5-AGCGTAACACCACCATTCC-3，下游：5-TGGCTCCCACCCTATCTC-3，进行PCR扩增，检测HSP70的基因表达量。
　　 结果显示：洛克沙胂抑制抗氧化物酶的活性，MDA含量在初、中期有明显升高；各染毒组动物肝组织中HSP70mRNA表达呈剂量.效应关系。与对照组相比，高剂量组表达明显增加，差异明显；低剂量组呈微弱表达或不表达，差异不明显。
　　 上述表明，洛克沙胂能够引起鸡的肝、肾等组织产生相应的病理变化，为动物性食品安全提供依据；能抑制抗氧化物酶的活性，从而降低机体对自由基引起的疾病的抵抗力；HSP70表达能够敏感的显示机体内砷中毒情况，可作为砷污染早期监测的生物标志物。