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八角茴香提取物对两种储粮害虫的生物活性及代谢酶的影响

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1 文献综述

1.1 我国储粮害虫的防治现状

1.2 植物源农药防治储粮害虫的研究进展

1.3 八角茴香概述

2 引 言

3 材料与方法

3.1供试植物

3.2 试虫的采集与饲养

3.4 八角茴香提取物的制备

3.5 生物活性测定方法

3.6 酶活性测定方法

4 结果与分析

4.1 不同溶剂对八角茴香干果的提取效果

4.2 八角茴香提取物对长角扁谷盗成虫的生物活性

4.3 对储粮害虫体内两种酶活性的影响

5 讨论

5.1 甲醇、乙酸乙酯和石油醚3种有机溶剂对八角茴香的提取

5.2 八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的作用方式

5.3 八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的作用机理

6 结论

6.1 甲醇、乙酸乙酯和石油醚3种有机溶剂对八角茴香的提取

6.2 八角茴香的3种溶剂提取物对对两种储粮害虫的作用方式

6.3 八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的作用机理

参考文献

致谢

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攻读硕士学位期间发表的学术论文:

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摘要

玉米象是一种初期性储粮害虫,被国家粮食部门列为头号储粮害虫;长角扁谷盗为一种重要的后期性仓储害虫。植物源农药属于无公害绿色农药,害虫对其不易产生抗药性。为开发环境友好的植物源杀虫剂,本研究采用3种有机溶剂对八角茴香干果进行提取,探索八角茴香提取物对这2种储粮害虫的杀虫活性及其作用机理。
  研究获得主要结果如下:
  1.不同溶剂对八角茴香干果的提取效果
  以甲醇、乙酸乙酯、石油醚3种有机溶剂采用冷浸法对八角茴香干果中的生物活性物质进行提取,3种有机溶剂对八角茴香干果的提取率从大到小依次为:甲醇>乙酸乙酯>石油醚。
  2.八角茴香干果的不同溶剂提取物对两种储粮害虫的生物活性研究
  2.1.八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的触杀作用
  分别设计了9.29、18.58、37.16、74.32、148.63μg/cm2五个处理剂量,采用滤纸药膜法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象和长角扁谷盗成虫的触杀效果。用148.63μg/cm2剂量处理72h后,甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物对玉米象的校正死亡率分别为85.43%、94.50%和91.08%;对长角扁谷盗的校正死亡率分别为87.85%、90.98%和94.44%。在对玉米象的触杀实验中,乙酸乙酯提取物的作用最强;在石油醚提取物对长角扁谷的作用明显大于其它两种溶剂提取物。在相同剂量下甲醇、石油醚提取物对玉米象的作用效果大于其对长角扁谷盗作用效果,而乙酸乙酯提取物正好相反。八角茴香的3种溶剂提取物的触杀效果均随着处理剂量的增加而显著增强,显示了明显的剂量效应。
  甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物处理玉米象成虫72h后的LD50分别为36.11、21.19和24.65μg/cm2,处理长角扁谷盗成虫72h后的LD50分别为28.21、23.51和19.23μg/cm2,显示3种八角茴香提取物对玉米象、长角扁谷盗均有较强的触杀作用。
  2.2.八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的驱避作用
  分别设计了7.72、15.43、30.86、61.73、123.46μg/cm2五个处理剂量,采用滤纸药膜法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象、长角扁谷盗成虫的驱避效果,八角茴香的同种溶剂提取物的剂量越高,其对玉米象和长角扁谷盗成虫驱避作用越大;甲醇、乙酸乙酯和石油醚3种溶剂提取物的最高剂量(123.46μg/cm2)的对玉米象成虫的平均驱避率分别为:53.15%、76.88%和69.49%,其驱避等级分别为Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅳ级;对长角扁谷盗成虫的平均驱避率分别为:62.23%、73.22%和40.16%,其驱避等级分别为Ⅳ级、Ⅳ级和Ⅲ级;八角茴香3种有机溶剂提取物对玉米象成虫驱避作用大小依次为:乙酸乙酯提取物>石油醚提取物>甲醇提取物,对长角扁谷盗成虫驱避作用大小依次为:乙酸乙酯提取物>甲醇提取物>石油醚提取物,说明在3种提取物中,乙酸乙酯的驱避作用最强,明显大于其它两种八角茴香提取物。
  2.3.八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的熏蒸作用
  分别设计了1.25、2.5、5.0、10.0、20.0mg/L处理剂量,采用密闭容器熏蒸法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象、长角扁谷盗成虫的熏杀效果,3种提取物对两种储粮害虫成虫均具有较强的熏杀作用,且3种提取物的熏杀效果均随着处理剂量的增加而显著增强。用最大剂量20.0mg/L处理72h后,甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物对玉米象的校正死亡率分别为90.26%、95.89%和92.57%;对长角扁谷盗的校正死亡率分别为89.93%、96.71%和91.56%。乙酸乙酯提取物对玉米象、长角扁谷盗的熏杀效果最强,甲醇提取物最弱。
  甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物处理玉米象成虫72h后的LD50分别为7.10、3.93和4.55mg/L,处理长角扁谷盗成虫72h后的LD50分别为7.16、4.57和5.42mg/L,显示八角茴香的3种溶剂提取物对长角扁谷盗、玉米象均有较强的熏杀作用。
  3.八角茴香的不同溶剂提取物对两种储粮害虫体内酶活性的影响
  3.1.八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫体内解毒酶的剂量效应
  分别用20.0、10.0、5.0、2.5、1.25mg/L5种剂量的八角茴香3种溶剂提取物熏蒸处理试虫,24h时测定玉米象成虫体内AchE、GSTs活性的变化。结果表明:3种提取物对试虫体内的AchE、GSTs活性均表现出明显的剂量效应,随着处理剂量的升高,对2种酶活力的抑制作用表现为增强的效果,3种溶剂提取物对AchE、GSTs活性的抑制作用最强为乙酸乙酯提取物,其次为石油醚和甲醇提取物。
  分别用相同剂量的八角茴香3种溶剂提取物熏蒸处理试虫,24h时测定长角扁谷盗成虫体内AchE、GSTs活性的变化。结果表明:3种提取物对试虫体内的AchE、GSTs活性均表现出明显的剂量效应,随着处理剂量的升高,对2种酶活力多数表现为抑制作用增强,而低剂量(1.25mg/L)的甲醇提取物对AchE具有一定的诱导作用;3种溶剂提取物对AchE、GSTs活性的抑制作用大小均表现为乙酸乙酯>石油醚>甲醇。提取物对酶活性的抑制作用与熏杀效果整体呈正相关,说明AchE、GSTs活性下降可能是造成试虫死亡的重要原因之一。
  3.2.八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫体内解毒酶的时间效应
  分别用八角茴香3种溶剂提取物的LD50剂量处理玉米象成虫,12、24、36、48、60、72h时测定试虫体内AchE、GSTs活性的变化,结果表明:48h时,甲醇、乙酸乙酯提取物对AchE抑制作用最高,石油醚提取物在72h对AchE抑制作用最高。石油醚、甲醇提取物在48h时对GSTs抑制作用最高,乙酸乙酯提取物在60h对GSTs抑制作用最高。
  分别用八角茴香3种溶剂提取物的LD50剂量处理长角扁谷盗成虫,12、24、36、48、60、72h时测定试虫体内AchE、GSTs活性的变化,结果表明:八角茴香3种溶剂提取物对AChE、GSTs的活性均有明显的抑制作用,石油醚、乙酸乙酯提取物对AchE、GSTs抑制作用在48h时达到最高,而甲醇提取物在60h对AchE、GSTs抑制作用最高。

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