CD147siRNA转染对恶性黑素瘤细胞增殖及其在体内外浸润和转移的影响

摘要

研究CDl47siRNA转染对恶性黑素瘤细胞株A375中CDl47表达及细胞增殖的影响，及其对A375细胞在体内外浸润和转移能力的影响。旨在进一步明确CDl47在恶性黑素瘤进展过程中的作用及机制，探讨将CDl47作为靶分子，运用siRNA技术对恶性黑素瘤进行基因治疗的可行性。 方法 1．将前期构建的重组质粒pSUPER/CDl47siRNA稳定转染至A375细胞中，采用半定量RT-PCR法检测转染细胞中CDl47mRNA的表达变化； 2．采用MTT法检测转染pSUPER/CDl47siRNA 24、48和72h后A375细胞增殖水平的变化； 3．采用Transwell法检测CDl47siRNA对A375细胞的体外侵袭能力的影响； 4．采用裸鼠皮下异种移植模型和肺转移模型观察CDl47siRNA对A375细胞在体内侵袭和转移能力的影响。 结果 1．转染pSUPER/CDl47siRNA后，A375细胞中CDl47mRNA的表达水平显著降低，二条针对CDl47不同位点的siRNA的干扰效果分别为90.81％(p<0.001)和13.37％(p<0.05)，并选择了抑制效果较好的细胞克隆，将其建立为稳定转染的恶性黑素瘤细胞株，用于开展下一步的研究； 2．CDl47siRNA使A375细胞在转染后24、48和72h的增殖水平均显著下降，其下降率分别为46.67％(p<0.05)，47.40％(P<0.01)和50.58％(p<0.01)： 3．CDl47siRNA转染显著下调了A375细胞的体外侵袭水平，下调率为50.75％(P<0.01)； 4．CDl47siRNA使裸鼠皮下肿瘤的大小降低了53.53％(p<0.01)，细胞肺转移的发生率亦由转染前的10/12降至0/12。 结论 1. CDl47与恶性黑素瘤的增殖、浸润和转移相关，可能是一种新的肿瘤治疗靶分子； 2．由siRNA介导的RNAi技术可能是一种有效的肿瘤基因治疗新方法。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

原创性说明及关于学位论文使用授权说明

前言

第一部分siRNA转染对恶性黑素瘤细胞株A375中CD147表达及细胞增殖的影响

第二部分CD147siRNA对恶性黑素瘤细胞株A375在体内外浸润和转移能力的影响

结论

参考文献

综述 恶性黑素瘤浸润和转移的研究进展

致谢

攻读学位期间主要的研究成果