API-MS离子化规律及LC-MS联用技术在药物和内源性物质代谢中的应用研究

摘要

大气压离子化(API)质谱是一种软电离技术，对于各种类型的化合物(包括极性的、不稳定的、大分子化合物、药物及代谢产物)，API都能进行有效的离子化。特别时近年来，API质谱与色谱的成功联用，这种技术越来越广泛被用在药物代谢和内源性物质的分析中，使微量成分的分析成为可能。对于无生色团．的化合物，该方法提供了一种普遍的检测手段。目前，HPLC-MS联用技术的飞速发展，已成为一种常规的应用技术。HPLC-MS联用技术将从现在主要应用于天然药物研究、药代动力学研究、药物筛选、复杂药物分析等药学领域，逐渐扩展到生物大分子、生命学科领域。未来分析方法学的进步将依赖于色谱分离技术及质谱检测能力的发展，与此同时，定量测定、筛选和鉴定靶向药物成分以及未知代谢物等分析应用又会进一步推动HPLC-MS联用技术的发展。论文从探讨ESI和APCI对不同类型化合物离子化规律入手，并以LC-MS作为主要研究工具，在建立LC-MS分析方法的基础上，检测了临床病人血浆中格列苯脲的代谢情况；对替米沙坦片剂进行了生物等效性研究；对阿奇霉素胶囊进行了相对生物利用度和绝对生物利用度研究；测定了人血浆中25-羟基维生素D3。论文内容主要包括以下几方面： 1应用ESI-MS和APCI-MS对各类药物及部分内源性化合物在不同的条件下进行全扫描，从质谱图中发现不同基团的化合物离子化时形成的加合物不同，不同结构的化合物离子化的方式也不尽相同，同一种化合物在不同离子化条件下会得到不同的分子离子。通过本试验初步总结出了化合物离子化的规律。2通过优化色谱和质谱条件，确定以ESI正离子方式测定人血浆中格列苯脲的含量，对方法的重复性和准确性也进行了验证，证明该方法灵敏度高和选择性、重复性好、可靠。应用此方法对9位临床糖尿病患者口服格列苯脲后血药浓度进行了监测，得出了药物浓度一时间曲线和动力学参数，为临床用药和治疗提供科学依据。 3 建立一种简便、快速、灵敏、选择性高的色谱一电喷雾质谱(LC-ESI-MS)分析方法测定血浆中替米沙坦含量。经验证，方法灵敏、准确、重复性好。选择18名健康志愿者对不同试验制剂替米沙坦进行了生物等效性研究，经统计学分析，试验药品与参比剂的药代动力学参数无显著性差异，它们之间完全等效。 4 阿奇霉素分子在酸性条件下被ESI离子化成为双质子化分子离子[M+2H]<'2+>，提高了离子化效率，采用LC-ESI选择离子检测测定人血浆中阿奇霉素。选择24名健康志愿者对试验药物阿奇霉素肠溶片(A)、对照药物阿奇霉素片(B)和对照药物注射用阿奇霉素(C)进行了相对生物利用度和绝对生物利用度研究，得出了试验药物阿奇霉素肠溶片(A)和对照药物阿奇霉素片(B)的绝对生物利用度，实验数据经过统计学处理表明，试验药物阿奇霉素肠溶片(A)和对照药物阿奇霉素片(B)两种制剂完全生物等效。 5.25-羟基维生素D3是维生素D3的一种代谢产物，在体内具有重要的生理生化功能，测定血浆中25-羟基维生素D3的含量对临床诊断非常有意义?本文建立了一种简便、灵敏、快速的LC-APCI-MS方法测定人血浆中的25-羟基维生素D3。对萃取的有机溶剂也进行了选择，确定正己烷为最佳的萃取溶剂。测定了320位不同年龄的排除了与羟基维生素D3代谢有关的人员血浆中25-羟基维生素D3，通过分组及统计分析得到：A(～30岁)组与C组(50～岁)之间有显著性差异(P<0.05)，而A组与B组(30～50岁)之间无显著性差异。

目录

文摘

英文文摘

第一章 前 言

第二章药物和部分内源性物质在API质谱中离子化规律的探讨

第三章液相色谱电喷雾质谱测定格列苯脲方法的建立及临床病人血药浓度监测

第四章替米沙坦血浆浓度测定方法及生物等效性研究

第五章LC-ESI-MS测定血浆中阿奇霉素及阿奇霉素肠溶片的人体相对生物利用度和绝对生物利用度研究

第六章LC-APCI-MS测定人血浆中维生素D3的代谢产物-25-羟基维生素D3的含量

参考文献

致 谢

攻读学位期间主要的研究成果