声明
缩略词
第1章绪论
1.1 HG的神经毒性
1.2 亚精胺的神经保护作用
1.3 CB1的神经保护作用
1.4 本课题的科学假说和研究思路
第2章 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.2 药品与试剂的配制
2.2.1 磷酸盐缓冲液 (Phosphate Buffered Solution, PBS) 的配制
2.2.2 HG母液 (81 mg/ml) 的配制
2.2.4 AM251 (100 μM) 母液的配制
2.2.5 多聚甲醛 (4%) 的配制
2.2.6 台盼蓝 (4%) 母液的配制
2.2.7 Tris-buffer 电泳缓冲液（1×）的配制
2.2.8 Tris-buffer 湿转液 (1×) 的配制
2.2.9 TBST的配制
2.2.10 过硫氨酸 (Ammonium Persulphate, AP, 10%) 的配制
2.2.11 脱脂牛奶（5％）的配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养和冻存
2.3.2 Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 检测细胞活力
2.3.3 β-半乳糖苷酸酶染色 (Senescence-associated β-galactosidase staining, SA-β-gal staining)
2.3.4 台盼蓝计数法绘制细胞生长曲线
2.3.5 Hoechst 33258 染色检测细胞凋亡形态
2.3.6 Annexin V/Propidium iodide (PI) 染色检测细胞凋亡
2.3.7 多功能微孔板检测系统检测HT22细胞中Caspase-3活性
2.3.8 Western blotting 检测 HT22 细胞内 P16INK4a、P21CIPL、Bax 和Bcl-2蛋白的表达
2.3.9 统计学处理
第3章 结果
3. 1 HG可诱导HT22细胞毒性
3.1.1 HG可降低HT22细胞活力
3.1.2 HG可诱导HT22细胞衰老
3.1.3 HG可诱导HT22细胞凋亡
3.2 Spd可拮抗HG诱导的HT22 细胞毒性
3.2.1 Spd可拮抗HG诱导的HT22细胞活力降低
3.2.2 Spd可拮抗HG诱导的HT22细胞衰老
3.2.3 Spd可拮抗HG诱导的HT22细胞凋亡
3.3 Spd可逆转HG对HT22细胞CB1受体的下调作用
3.3.1 HG可下调HT22细胞CB1受体
3.3.2 Spd可抑制HG诱导HT22细胞内CB1受体下调
3.4 阻断CB1 受体可逆转Spd 对HG 诱导HT22 细胞毒性的拮抗作用
3.4.1 AM251可逆转Spd对HG抑制HT22细胞活力的拮抗作用
3.4.2 AM251可逆转Spd对HG诱导HT22细胞衰老的抑制作用
3.4.3 AM251可逆转Spd对HG诱导HT22细胞凋亡的抑制作用
第4章 讨论
4.1 HG可诱导HT22细胞衰老和凋亡
4.2 Spd可抑制HG诱导的HT22细胞衰老和凋亡
4.3 CB1受体介导Spd对HG诱导的HT22细胞衰老和凋亡的保护作用
第5章 结论
参考文献
综述:大麻素系统在中枢神经系统中研究进展
攻读硕士期间的发表的论文
致谢
南华大学;
