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硒与杀菌剂协同对油菜菌核病与梨炭疽病的控制作用及其机理研究

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摘要

1 文献综述

1.1 硒

1.1.1 硒的作用

1.1.2 硒在植物中的吸收与转化

1.1.3 硒在植物病害防治的应用

1.1.4 富硒食品的标准

1.2 硒对植物体内生理指标的影响

1.2.1 硒与丙二醛(MDA)的关系

1.2.2 硒对防御酶系的影响

1.3 富硒油菜的研究现状

1.4 富硒梨的研究现状

1.5 油菜菌核病的研究现状

1.6 梨炭疽病研究现状

1.7 农药的使用现状

2 引言

3 材料与方法

3.1 试验材料

3.1.1 供试病原菌

3.1.2 供试品种

3.1.3 供试药剂

3.1.4 供试培养基

3.1.5 供试试剂和溶液

3.2 硒和杀菌剂对油菜菌核病菌的毒力测定和配方筛选

3.2.1 亚硒酸钠对油菜菌核病菌菌丝生长的影响

3.2.2 杀菌剂对油菜菌核病菌毒力测定

3.2.3 复配药剂配方筛选

3.3 硒及其混剂对油菜菌核病田间病斑拓展抑制效果

3.3.1 硒及其混剂对皖油13号品种菌核病的田间病斑拓展抑制效果

3.3.2 硒及其混剂对德杂油5号品种菌核病的田间病斑拓展的抑制效果

3.4 硒对油菜主要酶活性和丙二醛含量的影响

3.4.1 过氧化氢(CAT)酶活测定

3.4.2 过氧化物(POD)酶活测定

3.4.3 多酚氢化(PPO)酶活测定

3.4.4 丙二醛(MDA)含量的测定

3.5 富硒油菜的安全性评价

3.5.1 硒对油菜发芽的影响

3.5.2 硒对油菜出苗的影响

3.5.3 硒对油菜苗期根长和株高的影响

3.5.4 硒对油菜苗期叶片生长的影响

3.5.5 油菜富硒水平

3.6 硒和杀菌剂对梨炭疽病菌的毒力测定和配方筛选

3.6.1 硒对梨炭疽病菌菌丝生长的影响

3.6.3 复配药剂配方筛选

3.7 硒及其混剂对梨炭疽的控病效果

3.8 硒对梨果实主要酶活性的影响

3.9 富硒梨的安全性评价

4 结果与分析

4.1 硒和杀菌剂对油菜菌核病的控制作用

4.1.1 亚硒酸钠对油菜菌核病菌丝生长的影响

4.1.2 杀菌剂对油菜菌核病菌的菌丝生长的影响

4.1.3 硒和杀菌剂复配对油菜菌核病菌的抑制作用

4.1.4 硒及其混剂对油菜菌核病田间病斑拓展抑制效果

4.1.5 硒对油菜主要酶活性和丙二醛含量的影响

4.2 富硒油菜的安全性评价

4.2.1 硒对油菜发芽的影响

4.4.2 硒对油菜出苗的影响

4.2.3 硒对油菜苗期根长和株高的影响

4.2.4 硒对油菜苗期生长的影响

4.2.5 油菜富硒水平

4.3 硒和杀菌剂对梨炭疽病菌的控病效果

4.3.1 亚硒酸钠对梨炭疽菌丝生长的影响

4.3.2 杀菌剂对梨炭疽菌菌丝生长的影响

4.3.3 硒和杀菌剂复配对梨炭疽菌菌丝生长的影响

4.3.4 硒及其混剂对梨炭疽的控病效果

4.4 硒对梨果实主要酶活性的影响

4.5 富硒梨的安全性评价

5 讨论

5.1 硒和杀菌剂对油菜菌核病的控制作用

5.2 富硒油菜的安全性评价

5.3 硒和杀菌剂对梨炭疽病的控病效果

5.4 硒对梨果实主要酶活性的影响

5.5 富硒梨的安全性评价

6 结论

6.1 硒和杀菌剂对油菜菌核病的控制作用

6.2 富硒油菜的安全性评价

6.3 硒和杀菌剂对梨炭疽病的控病效果

6.4 硒对梨果实主要酶活性的影响

6.4 富硒梨的安全性评价

参考文献

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摘要

硒是一种人体所需的微量元素,有助于人体健康,同时也能促进作物生长,提高作物品质。而亚硒酸钠作为硒源,不仅能够被植物吸收利用,同时也有抑制病害的效果。油菜菌核病是油菜的第一大病害,在我国各大产区均有发生,严重降低了油菜的产量和品质,造成经济损失。梨炭疽病是发生在梨树上主要病害之一,常在梨果实贮藏期发生,能造成大批果实腐烂。随着全球气候环境变化的进一步加剧,病害的危害愈来愈严重,为保障农产品质量安全,迫切需要研究新的防治途径。而化学防治是两种病害常用的防治手段,,但化学药剂的施用会带来环境和食品安全等诸多问题。本文研究硒对油菜菌核病和梨炭疽病的控制作用,从硒以及硒与杀菌剂的复配对病原菌的毒力测定,硒以及硒和杀菌剂的复配的控病效果,对作物的安全性评价等几个方向进行研究,为绿色防控,农药减量和功能农业生产提供技术支撑,所获主要结果报告如下:
  1.硒和杀菌剂对油菜菌核病的控制作用
  采用室内毒力测定的方法研究了亚硒酸钠和杀菌剂对油菜菌核病菌的抑制作用,结果发现亚硒酸钠对油菜菌核病菌菌丝有抑制作用,其EC50为113.9651μg.mL-1。杀菌剂对油菜菌核病菌丝的抑制效果中,吡唑醚菌酯、多菌灵、戊唑醇和申嗪霉素抑制效果较好,EC50分别为0.0121μg.mL-1,0.1773μg.mL-1,0.6387μg.mL-1,0.8695μg.mL-1。选择多菌灵、申嗪霉素和吡唑醚菌酯与亚硒酸钠进行复配,其中亚硒酸钠与申嗪霉素混剂组合A和B及亚硒酸钠和多菌灵的混剂组合A,对抑制油菜菌核病菌菌丝具有增效作用。
  亚硒酸钠及其混剂对两种油菜品种进行菌核病的病斑拓展抑制的效果研究,第2次施药时防治效果明显比第1次施药时效果有差异。在皖油13号油菜品种中,亚硒酸钠单独施用时,第1次施药后防效最高能达到48.72%。混剂组合中亚硒酸钠与申嗪霉素的3∶2的组合防治效果最好,防效在第1次施药后达到了67.35%,第2次施药后为63.24%。德杂油5号油菜品种中,亚硒酸钠单独处理时,第1次施药后的防效最高能达到28.46%,第2次施药后达到31.65%,亚硒酸钠与申嗪霉素的3∶2的混剂组合在第1次施药后防治效果能达到25.27%,第2次为35.52%。
  亚硒酸钠处理苗期油菜后,油菜中PPO酶活、POD酶活性以及MDA含量均发生了相应的变化,而CAT酶活性没有太大的变化。而这些酶及MDA与植物的抗病性有关,说明亚硒酸钠能够诱导油菜产生抗病性。
  2.富硒油菜的安全性评价
  亚硒酸钠的处理浓度对油菜的发芽和出苗率均有不同程度的影响,对油菜的根长和芽长均有毒害作用,说明施硒不能采用浇灌、伴土等方式。亚硒酸钠对油菜生长试验中显示,喷施240μg.mL-1和480μg.mL-1浓度的亚硒酸钠对油菜有药害作用,但老叶可以修复,嫩叶则不能,说明喷施时应避免苗期。亚硒酸钠在盛花初期时喷施油菜,随着亚硒酸钠的浓度的增加,油菜籽的硒含量也越来越高,但均在安全标准之内。
  结合研究结果说明生产富硒油菜时,应避免浇灌、伴土等方式施用硒,也应避免苗期喷施硒,对油菜造成药害,要选择盛花初期喷施硒,既能生产富硒油菜,同时还能控制油菜菌核病,为生产功能性农业提供一个理论基础。
  3.硒和杀菌剂对梨炭疽菌的控病效果
  采用室内毒力测定的方法研究亚硒酸钠和杀菌剂对梨炭疽菌菌丝生长的影响结果表明,亚硒酸钠对梨炭疽菌丝生长有抑制作用,其中亚硒酸钠对菌丝的EC50为137.6037μg.mL-1。杀菌剂对梨炭疽菌抑制效果较好的是吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑和戊唑醇,其EC50分别为0.5397μg.mL-1,0.6760μg.mL-1和2.2006μg.mL-1。将亚硒酸钠和杀菌剂单剂结合对梨炭疽病菌的菌丝生长的影响中,发现亚硒酸钠和戊唑醇1∶1的混剂配方对抑制梨炭疽菌菌丝有一定的增效作用。
  采用喷施和浸泡两种处理方式来研究亚硒酸钠及其混剂对采后梨炭疽病控制效果,结果表明,混剂和亚硒酸钠单独施用在两种处理下对采后梨炭疽病均有控制作用,但浸泡效果相比之下优于喷施效果。其中150μg.mL-1亚硒酸钠浸泡2h防效达到23.72%,喷施最高的防效为21.40%。亚硒酸钠和戊唑醇的混剂浸泡2h防效约90%左右,喷施防效约15%左右。
  4.硒对梨果实主要酶活的影响
  经过浸泡处理后,亚硒酸钠可以明显地提高梨果实在接菌后的CAT和POD酶活性,而PPO酶活性变化不是很明显。硒处理后的梨果实在接菌后第3d的CAT、POD以及PPO酶活性均达到最高,均高于其他组,6d后,三种酶活都趋于平衡,说明硒与梨的抗病性相关。
  5.富硒梨的安全性评价
  在40μg.mL-1的亚硒酸钠浓度下浸泡梨果实,测定硒在梨表皮和果肉中组织的分布情况。结果表面,硒在表皮的含量最高,其中40μg.mL-1的亚硒酸钠浸泡梨果实后表皮中的硒含量在1.515μg.g-1,比对照中硒含量高10倍左右。在果肉中,硒的含量都明显少于表皮,且随着梨核的接近,硒的含量会越来越低。其中40μg.mL-1的亚硒酸钠浸泡梨果实后果肉组织中的硒含量在
  0.143μg.g-1~0.449μg.g-1之间,符合富硒食品的安全标准。

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