声明
英文缩略词表
引言
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器设备
1.1.1组织标本、细胞、动物
1.1.2主要试剂
1.1.3实验仪器
1.2 实验方法
1.2.1免疫组化(IHC)
1.2.2细胞培养
1.2.3 CCK 8法检测药物细胞毒性
1.2.4划痕实验检测细胞迁移
1.2.5 Transwell检测细胞迁移与侵袭
1.2.6流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡
1.2.7 FCM检测细胞周期
1.2.8 RT-qPCR检测与JAK2-STAT3通路相关基因mRNA的表达量
1.2.9 Western blot检测与JAK2-STAT3通路相关蛋白的表达水平
1.2.10流式细胞术检测胰腺癌细胞PAN02表面MHC分子表达
1.2.11免疫荧光(IF)检测胰腺癌细胞PANC-1/PAN02中Ki 67及p-STAT3的表达变化
1.2.12动物实验
1.2.13统计学分析
2 结果
2.1 临床标本检测结果
2.1.1临床人胰腺癌组织中p-STAT3表达相较于正常胰腺组织显著升高
2.2 体外实验结果
2.2.1 WP1066显著抑制胰腺癌细胞PANC-1/PAN02增殖
2.2.2 WP1066抑制胰腺癌细胞PANC-1/PAN02迁移
2.2.3 WP1066抑制胰腺癌细胞PANC-1/PAN02迁移和侵袭
2.2.4 WP1066诱导胰腺癌细胞PANC-1/PAN02凋亡
2.2.5 WP1066阻滞胰腺癌细胞PANC-1/PAN02周期进程
2.2.6 WP1066诱导PANC-1/PAN02细胞及移植瘤组织中与JAK2-STAT3通路相关基因及蛋白的表达改变
2.2.7 WP1066抑制胰腺癌PANC-1/PAN02细胞中Ki 67及p-STAT3表达
2.2.8 WP1066诱导胰腺癌细胞PAN02表面MHC分子表达
2.3 体内实验结果
2.3.1 WP1066显著抑制荷胰腺癌小鼠移植瘤生长且无明显肝肾毒副作用
2.3.2 WP1066增强了荷胰腺癌小鼠移植瘤组织中肿瘤细胞表面MHC分子表达,降低PD-L1表达
2.3.3 WP1066使荷胰腺癌小鼠移植瘤组织中浸润的CD8+T、NK及NKT细胞百分比增多
2.3.4 WP1066使荷胰腺癌小鼠移植瘤组织中浸润的MDSCs及Treg细胞百分比减少
2.3.5 WP1066促进与肿瘤细胞共培养后的淋巴细胞增殖,增加抗肿瘤细胞因子IFN-γ、IL-2的分泌,减少免疫抑制细胞因子TGF-β的分泌
2.3.6 WP1066使荷胰腺癌小鼠胸腺上皮细胞增多,胸腺细胞亚群细胞数量增加,且脾脏中T细胞亚群细胞数量增加。
3 讨论
4 结论
参考文献
5 综述:胰腺癌免疫治疗新进展
致谢
附录:攻读硕士学位期间发表的部分学术论著
三峡大学;