声明
引言
1 绪论
1.1 研究的背景与意义
1.2 国内外研究进展
1.2.1酮基还原酶的相关研究进展
1.2.2近平滑假丝酵母的相关研究进展
1.3 酮基还原酶的粗提取
1.3.1酶活的测定的研究
1.3.2酵母菌的破碎方法的研究
1.3.3粗提方法的研究
1.4 课题研究目的与内容
2.1 试验材料
2.1.1菌株
2.1.2培养基
2.1.3主要试剂
2.1.4主要仪器
2.2 实验方法
2.2.1酵母菌的培养与收集
2.2.2粗酶液制备
2.2.3蛋白质浓度的测定
2.2.4酮基还原酶的酶活力的测定
2.2.5反应有效性的验证
2.3 结果与分析
2.3.1破碎方法的选择
2.3.2反应有效性的验证
2.4 结论
3.1 材料与方法
3.1.1菌株
3.1.2培养基
3.1.3主要试剂
3.1.4主要仪器
3.2 实验方法
3.2.1酵母菌的培养与收集
3.2.2蛋白质浓度的测定
3.2.3酮基还原酶的酶活力的测定
3.2.4高压均质破碎操作
3.2.5正交试验设计
3.3 结果与分析
3.3.1近平滑假丝酵母 ATCC 7330均质破碎正交试验粗酶液酶活分析
3.3.2近平滑假丝酵母 ATCC 7330均质破碎最优条件确定与验证
3.3.3近平滑假丝酵母破碎显著性因素分析
3.4 结论
4.1 材料与方法
4.1.1菌株
4.1.2培养基
4.1.3主要试剂
4.1.4主要仪器
4.2 实验方法
4.2.1酵母菌的培养与收集
4.2.2蛋白质浓度的测定
4.2.3双水相体系的建立
4.2.4酮基还原酶的酶活力的测定及纯化倍数的计算
4.2.5最佳提取工艺的确定
4.3 结果与分析
4.3.1无机盐种类对酮基还原酶萃取效果的影响
4.3.2考察双水相中不同PEG的分子量对萃取效果影响
4.3.3考察双水相在不同温度下对萃取效果影响
4.3.4考察双水相萃取时间的不同对萃取效果影响
4.3.5考察双水相中不同PEG的浓度对萃取效果影响
4.3.6考察双水相中不同硫酸铵的浓度对萃取效果影响
4.3.7正交试验优化
4.4 结论
5.1 材料与方法
5.1.1菌株
5.1.2培养基
5.1.3主要试剂
5.1.4主要仪器
5.2 实验方法
5.2.1酵母菌的培养与收集
5.2.2蛋白质浓度的测定
5.2.3酮基还原酶的酶活力的测定
5.3 研究主要方法的选择
5.4 实验结果与存在的问题
5.5 后续实验的方案与改进
6.1 材料与方法
6.1.1菌株
6.1.2培养基
6.1.3主要试剂
6.1.4主要仪器
6.2 实验方法
6.2.1酵母菌的培养与收集
6.2.2粗酶液的制备
6.2.3酮基还原酶的酶活力的测定
6.2.4酶的最适反应温度的测定
6.2.5酶的热稳定性的测定
6.2.6酶的最适反应pH的测定
6.2.7酶的pH稳定性的测定
6.2.8金属离子对酶活的影响的检测
6.3 结果与分析
6.3.1酶的最适反应温度
6.3.2酶的热稳定性
6.3.3酶的最适反应pH
6.3.4酶的pH稳定性
6.3.5金属离子对酶活的影响
6.4 结论
7.1 结论
7.2 创新点
7.3 展望
参考文献
致谢
附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著
三峡大学;
