延龄草皂苷成分诱导结肠癌细胞自噬与凋亡的机制研究

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英文缩略词表

引言

材料与方法

1.1仪器设备

1.1.1实验仪器和设备

1.1.2 主要试剂和材料

1.1.3主要试剂配制步骤

1.2.1 细胞复苏

1.2.2 细胞传代

1.2.3 细胞冻存

1.2.4 细胞计数

1.2.5 MTT细胞增殖实验

1.2.6 质粒扩增、转化、涂板、挑克隆

1.2.7 小提质粒

1.2.8 pEGFP-LC3质粒转染

1.2.9 电镜标本制备

1.2.10 激光共聚焦显微镜观察pEGFP-LC3荧光蛋白细胞内定位

1.2.11 流式细胞术检测细胞周期

1.2.12 流式细胞术检测细胞凋亡

1.2.13 蛋白质免疫印迹

1.2.14慢病毒感染结肠癌CT26细胞(1/2小体积感染法)

结果

一、TTB2对HCT116细胞增殖及周期的影响

1.1 MTT法检测TTB2对HCT116细胞增殖的抑制作用

1.2 光学显微镜下观察TTB2对HCT116细胞的影响

1.2 流式细胞术检测TTB2对HCT116细胞周期的影响

二、TTB2对结肠癌HCT116细胞自噬的影响

2.1透射电镜观察TTB2诱导HCT116的细胞自噬

2.2共聚焦显微镜观察TTB2对HCT116细胞的影响

2.3 Western Blot检测TTB2处理HCT116细胞后对自噬相关蛋白表达的影响

三、TTB2对HCT116细胞凋亡的影响

3.1 流式细胞术检测TTB2诱导HCT116的发生凋亡作用

3.2 Western blot检测TTB2对HCT116的诱导凋亡作用

四、TTB2对HCT116细胞自噬与凋亡关系的影响

4.1 流式细胞术检测TTB2联合运用自噬抑制剂或自噬激动剂处理HCT116后对细胞凋亡的影响

4.2 Western Blot 检测TTB2联用自噬激动剂RAPA对凋亡相关蛋白表达的影响

五、TTB2对mTOR信号通路蛋白表达的研究

六、TTB2对结肠癌细胞内RAS蛋白靶点的影响

讨论

结论

参 考 文 献

综述:延龄草皂苷成分药理作用及其机制研究进展

后记

附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著