乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌临床特征的相关性研究

摘要

目的：建立用多对型特异性引物-聚合酶链反应法检测HBV的基因型。了解湖北地区HCC患者HBV基因型的分布；并探讨不同基因型与肝癌临床特征的相关性。 方法：利用多对型特异性引物-聚合酶链反应法检测HBV的基因型，选取分型为C基因型的样本用高保真DNA聚合酶PCR经分离、纯化、筛选和酶切鉴定，获得的阳性克隆用CEQ2000XL全自动测序仪测序，结果与Genebank发表的HBV序列进行同源性分析，用最大相似法绘制HBV全S基因发生树，邻近法验证。选择湖北地区HBVDNA阳性的慢性HBV感染患者297例，其中表面抗原携带者(ASC)52例、慢性肝炎(CHB)56例、重型肝炎32例、肝硬化22例和HCC135例，用多对型特异性引物-聚合酶链反应方法检测HBV的基因型；比较肝癌和肝炎患者基因型的分布；进一步分析135例HBVDNA阳性HCC患者HBV的基因型分布情况，分析HCC患者HBV基因型与HBVDNA水平和HBeAg阳性率、ALTASTTBILAFP的水平、肝癌病理分级及生存率等临床特征的相关性。 结果：多对HBV型特异性引物-聚合酶链反应法可以简易快速准确鉴定HBV基因型。鉴定出297份HBVDNA阳性血清标本中，B基因型218例(73.4％)，C基因型65例(21.9％)，BC混合型14例(4.7％)，未发现A、D、和E基因型；我们比较CHB与HCC患者的HBV复制程度发现，HCC患者的血清HBVDNA水平和HBeAg阳性率均显著低于CHB。135例HCC患者中，B基因型102例(75.6％)、C基因型26例(19.2％)、BC混合基因型7例(5.2％)；不同年龄、性别和HBV基因型无明显关系；C型HBVDNA水平及HBeAg阳性率明显高于B型；C型ALTASTTBILAFP的水平均较B型高，差异有显著性；1年生存率B型84.42％，C型仅为69.57％；三组基因型与肿瘤病理分级之间无显著性差异。 结论：确定多对型特异性引物-聚合酶链反应检测HBV基因型的方法简易、快速、准确；该方法可用于HBV基因型的流行病学调查；湖北地区存在HBV的B、C和BC混合基因型，B基因型为HCC患者的优势基因型；HCC患者HBV不同基因型与HCC的临床特征有相关性，C型HBVDNA水平明显高于B型，肝脏损害较重，生存率低。

目录

引 言

第一部分多对型特异性引物-聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒基因型方法的建立

第二部分湖北地区肝细胞癌患者乙型肝炎病毒基因型的分布

第三部分乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌临床特征的相关性

小 结

综述1乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌的研究进展

综述2乙型肝炎病毒致肝细胞癌的分子机制研究进展

致 谢