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目 录
中英文缩略词表
引言
第一部分 KLF5对ATC细胞生物学特性的影响研究
1 前言
2 实验材料
2.1 实验细胞
2.2 实验试剂
2.3 实验仪器
2.4 实验主要试剂的配制
3 实验方法
3.1 细胞培养
3.2 qRT-PCR检测KLF5在各种ATC细胞系中的表达
3.3 Western blot检测蛋白的表达
3.4 KLF5干扰载体的构建
3.5 重组慢病毒载体包装和滴定
3.6 慢病毒滴度的测定
3.7 稳定细胞系构建
3.8 MTT检测细胞增殖情况
3.9 流式细胞术实验检测细胞凋亡情况
3.10 Transwell小室实验检测细胞侵袭情况
3.11 划痕实验检测细胞迁移情况
3.12 统计学处理
4 实验结果
4.1 KLF5在各种ATC细胞系中的表达
4.2 KLF5干扰慢病毒载体的构建
4.3 KLF5干扰慢病毒包装和滴定
4.4 KLF5干扰稳定细胞的构建
4.5 KLF5的敲除效率测定
4.6 敲除KLF5对ATC细胞增殖影响
4.7 敲除KLF5对ATC细胞中Ki67表达影响
4.8 敲除KLF5对ATC细胞凋亡影响
4.9 敲除KLF5对ATC细胞中cleaved caspase-3蛋白表达的影响
4.10 敲除KLF5对ATC细胞侵袭的影响
4.11 敲除KLF5对ATC细胞迁移的影响
4.12 敲除KLF5对ATC细胞中MMP-2 和MMP-9蛋白表达的影响
5 讨论
6 结论
参考文献
第二部分 KLF5对ATC细胞阿霉素敏感性的影响及机制研究
1 前言
2 实验材料
3.1 KLF5过表达载体的构建
3.2 重组慢病毒载体的包装和滴定
3.3 慢病毒滴度测定
3.4 稳定细胞系的构建
3.5 Western blot
3.6 MTT实验检测细胞增殖情况
3.7 克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力
3.8 MTT检测细胞对阿霉素的药物敏感性
3.9 流式细胞术检测细胞凋亡情况
3.10 qRT-PCR 检测HTh74 和HTh74Rdox 细胞中MDR1 和ABCG2 的表达
3.11 统计学处理
4 实验结果
4.1 KLF5过表达载体的构建
4.2 KLF5过表达载体的包装和滴定
4.3 KLF5过表达稳定细胞的构建
4.4 HTh74和HTh74Rdox细胞中KLF5 的表达
4.5 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞增殖的影响
4.6 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞克隆形成的影响
4.7 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞中Ki67表达的影响
4.8 KLF5对阿霉素处理后HTh74和HTh74Rdox细胞活性的影响
4.9 KLF5对阿霉素处理后HTh74和HTh74Rdox细胞凋亡的影响
4.10 KLF5 对阿霉素处理后 HTh74 和 HTh74Rdox 细胞中 cleaved caspase-3表达的影响
4.11 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞中MDR1和ABCG2表达的影响
4.12 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞中P-gp蛋白表达的影响
4.13 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞中ABCG2蛋白表达的影响
4.14 KLF5对HTh74和HTh74Rdox细胞中JNK信号通路的影响
5 讨论
6 结论
参考文献
第三部分 KLF5影响ATC移植瘤生长及对阿霉素敏感性的体内研究
1 前言
2 实验材料
2.1 实验动物和细胞
2.2 实验试剂
2.3 实验仪器
2.4 主要试剂的配制
3 实验方法
3.1 ATC移植瘤的构建
3.2 石蜡切片
3.3 HE染色
3.4 免疫组化
3.5 Western blot
3.6 统计学处理
4 实验结果
4.1 敲除KLF5对阿霉素治疗后荷瘤小鼠重量的影响
4.2 敲除KLF5对阿霉素治疗后ATC移植瘤体积的影响
4.3 敲除KLF5对阿霉素治疗后ATC移植瘤重量的影响
4.4 敲除KLF5对阿霉素治疗后ATC移植瘤组织病理的影响
4.5 阿霉素治疗后ATC移植瘤中KLF5 蛋白的表达
4.6 敲除KLF5对阿霉素治疗后ATC移植瘤中JNK信号通路的影响
5 讨论
6 结论
参考文献
全文结论
综述:甲状腺未分化癌的研究进展
参考文献
个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果
致 谢
郑州大学;
