关于AtNAC091膜结合转录因子的基因克隆以及逆境胁迫下的生物学功能研究

目录

1 文献综述

1.1喀斯特生态环境特征

1.2内质网胁迫应答研究

1.2.1 内质网质量监控系统（ERQC）

1.2.2 内质网相关的蛋白质降解ERAD

1.2.3 非折叠蛋白应答(UPR)

1.2.4 参与内质网胁迫应答途径的分子伴侣

1.3 转录因子概述

1.4 植物转录因子参与胁迫应答的研究进展

1.4.1 WRKY

1.4.2 MYB

1.4.3 bZIP

1.5 膜结合转录因子概述

1.6 植物膜结合转录因子参与胁迫应答的研究进展

1.6.1 bZIP28/bZIP60

1.6.2 NAC017/NAC062/NAC089

1.7 NAC家族转录因子研究进展

1.7.1 简述NAC转录因子

1.7.2 NAC转录因子结构特点

1.7.3 NAC转录因子的调控机制

1.7.4 NAC转录因子生物学功能的研究进展

1.8本研究的目的和意义

2 实验材料与方法

2.1实验材料

2.1.1 植物材料

2.1.2 实验所用菌株

2.1.3 实验所用质粒

2.1.4 试剂盒

2.1.5 酶

2.1.6 主要化学试剂

2.1.7 主要实验仪器

2.2实验方法

2.2.1 拟南芥种子种植

2.2.2 植物DNA、RNA的提取

2.2.3 RNA逆转录

2.2.4 qRT-PCR

2.2.5 普通PCR扩增

2.2.6 载体构建

2.2.7 感受态细胞的制备

2.2.8 细菌转化

2.2.9 植物生理指标测量

2.2.10 植物总蛋白提取

2.2.11 蛋白免疫印迹实验（Western blot）

3 实验结果

3.1 NAC091在内质网胁迫诱导剂作用下表达上调

3.2 NAC091的诱导表达受到bZIP60的直接调控

3.3过表达载体、功能缺失突变体的构建

3.3.1 过表达载体的构建

3.3.2 融合载体的构建

3.3.3 突变体的构建

3.4 NAC091具有转录激活活性

3.5 NAC091蛋白在内质网胁迫下从质膜向细胞核转移

3.5.1 NAC091在细胞中的亚细胞定位

3.5.2 在内质网胁迫下，NAC091蛋白分子量发生改变

3.6 NAC091在内质网胁迫应答中的功能分析

3.6.1 过表达NAC091D能够提高植物在内质网胁迫途径中的抗性

3.6.2 nac091内质网胁迫途径中的功能具有冗余现象

3.7转录组分析过表达NAC091调控的下游基因

3.8 nac091突变体中相关的下游基因表达受到抑制

3.9 NAC091参与的其他非生物胁迫途径

4 结论与讨论分析

4.1 结论

4.2 讨论分析

5 展望

参考文献

附录

致谢

攻读硕士学位期间主要研究成果

声明