摘要：本文使用RG108处理猪胎儿成纤维细胞(PFF),研究其对细胞甲基化水平和核移植效率的影响.使用0.005,0.05,0.5和5μM RG108四种浓度分别处理细胞24,48和72h后,用高效液相色谱法(HPLC)分析细胞甲基化水平;MTT法及荧光显微镜观察法检测RG108对细胞生长及凋亡的影响;Giemsa染色分析四种浓度处理72h后细胞的染色体变化及对核移植效率的影响.通过两因素方差分析,结果显示RGl08处理浓度与处理时间无交互作用(P＞0.05),四种处理浓度间细胞甲基化水平差异不显著(P＞0.05),但不同处理时间却能显著的影响甲基化水平(P＜0.05)。5μMRG108处理细胞72h后甲基化水平显著低于对照组(3.80％±0.12％ vs 5.37±0.14％,P＜0.05).RG108对细胞生长有一定的抑制作用,且0.05,0.5和5μM组经处理72h后凋亡比例显著提高(3.54％±0.85％,4.62％±1.16％,6.34％±0.87％ vs l.57％±0.49％,P＜0.05).RG108处理对细胞的染色体数目没有显著影响.0.5和5μM RGl08处理72h后的PFF作为供体进行核移植,结果与对照组相比,显著提高了其卵裂率(62.07±2.74％,66.67±2.20％ vs 55.81±1.27％,P＜0.05)和囊胚细胞数(39.8±10.7,39.4±5.1 vs 35.9±7.1,P＜0.05),0.5μM组囊胚率显著高于对照组((16.24±0.67％vs12.80±1.49％,P＜0.05)).结果表明,RG108处理能降低细胞甲基化水平,且呈时间依赖性.虽然处理后细胞活力有所下降,凋亡比例增加但染色体数目不发生显著变化,PFF经0.5μM浓度处理72h组能显著提高核移植胚胎效率。
