西瓜藤石油醚提取物抗炎作用及其机理初探

摘要

目的:研究西瓜藤石油醚提取物抗炎作用并探讨其作用机理,为将其开发为一种新的药用资源提供实验研究依据。　　方法:①取小鼠50只,雌雄各半,按体重随机分为5组,即空白组,地塞米松组(DXM),西瓜藤石油醚提取物低、中、高剂量组。灌胃给药,每 d1次,连续10 d。采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型,观察致炎30min后西瓜藤石油醚提取物对小鼠耳廓肿胀程度及抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增高程度;采用蛋清致小鼠足肿胀模型,于致炎后0.5h、1h、2h、3h、4h用自制卷尺测量足踝周长,观察西瓜藤石油醚提取物对小鼠足跖肿胀程度。②取大鼠60只,雌雄各半,按体重随机分为6组,即正常组,空白组, DXM组,西瓜藤石油醚提取物低、中、高剂量组。灌胃给药,每 d1次,连续20 d。采用棉球肉芽肿模型,观察棉球肉芽肿周围血管形态,一步法测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS),ELISA法测定环氧合酶-1(COX-1)、环氧合酶-2(COX-2)、TNF-α和IL-1β水平。取大鼠50只,按体重随机分为5组,即空白组,DXM组,西瓜藤石油醚提取物低、中、高剂量组。灌胃给药,每 d1次,连续20 d。采用角叉菜胶致大鼠足肿胀模型,于致炎后0.5h、1h、2h、3h、4h用排水法测量足跖肿胀程度, ELISA法测定大鼠肿足炎性渗出物中丙二醛(MDA)、前列腺素2(PGE2)、5-羟色胺(5-HT)、组织胺(His)和总蛋白含量,一步法测定血清中 NO、NOS的含量,紫外分光光度法测总超氧化物歧化酶(SOD)活性和ELISA法测定COX-1及COX-2的含量。取小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,正常组、空白组,DXM组和西瓜藤石油醚提取物低、中、高剂量组。采用弗氏完全佐剂致小鼠佐剂性关节炎模型,除正常对照组小鼠右后足跖垫部皮内注射生理盐水50μl外,其余各组小鼠均于左后足跖皮内注射50μl弗氏完全佐剂(FCA)致炎;于致炎后11 d至17 d,分别以西瓜藤石油醚提取物低、中、高剂量组连续灌胃给药治疗7 d,排水法测量致炎足与继发侧足肿胀度,按5级评分法计算关节炎指数(AI),检测胸腺指数及脾脏指数,ELISA法测定佐剂性关节炎模型小鼠血清中类风湿因子(RF)、PGE2含量和TNF-α、IL-1β水平对其抗炎机理进行探讨。　　结果:①西瓜藤石油醚提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用,高、中剂量组抑制率分别为45.94％( P<0.01)和40.54％(P<0.05);显著性抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加(P<0.05, P<0.01);显著性抑制蛋清致小鼠足肿胀,高剂量组足肿胀抑制率为20.22％,中剂量组足肿胀抑制率为17.10％。②高剂量组可显著抑制棉球致大鼠肉芽肿棉球肉芽组织增生,减轻大鼠棉球肉芽肿重量(P<0.01),显著性降低棉球肉芽肿大鼠血清中NO、NOS、COX-1、COX-2、TNF-α和 IL-1β水平(P<0.05,P<0.01);各剂量组对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀均有不同程度抑制作用,能降低肿足炎性渗出物中MDA、PGE2、5-HT、His及总蛋白含量,抑制血清中COX-1、COX-2、NO和NOS的升高,提高SOD的活性(P<0.05,P<0.01);改善佐剂性关节炎小鼠脾脏指数和胸腺指数,高剂量组治疗4 d(致炎后14 d)后可明显减轻继发性关节炎小鼠的足肿胀度(P<0.05),而中、低剂量组抑制作用不明显,各剂量组可明显降低关节炎小鼠的AI值和抑制RF水平(P<0.01),对TNF-α的水平均有降低,但无显著性差异,高剂量组显著性降低佐剂性关节炎小鼠血清PGE2和IL-1β含量。　　结论:1.西瓜藤石油醚提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀模型、小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型、鸡蛋清致小鼠足肿胀模型、棉球致大鼠肉芽肿模型、角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、小鼠佐剂性关节炎模型的炎症有一定抗炎作用。2.西瓜藤石油醚提取物抗炎机理可能与选择性抑制COX-1、COX-2表达水平,减少PGE2合成,降低5-HT、His及总蛋白含量,降低TNF-α、IL-1β水平,抑制NO和NOS生成,恢复SOD活性有关。

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引言

第一部分 西瓜藤石油醚提取物抗炎作用药效学研究

1 材料和方法

2 实验结果

3 小 结

第二部分 西瓜藤石油醚提取物抗炎作用机理研究

1 材料与方法

2 实验结果

3 小结

讨论

1 炎症模型的筛选

2 影响实验因素

3 西瓜藤石油醚提取物对相关炎症因子的影响

结论

存在的问题和展望

参考文献

附图1 棉球肉芽肿组织表观图

缩 略 词 表

综述

致谢

个人简历及攻读学位期间获得的科研成果