五种外源酶制剂在花鲈饲料中的应用研究

摘要

本论文研究了在饲料中分别添加蛋白酶（protease）、脂肪酶（lipase）、木聚糖酶（xylanase）、复合非淀粉多糖酶（mixed non-starch polysaccharide enzymes）和植酸酶（phytase）五种外源酶制剂对花鲈（Lateolabrax japonicus）幼鱼生长性能、体成分、血清生化、免疫和抗氧化指标、消化酶活性、前肠组织结构及养殖水体氮磷含量的影响。详细试验内容以及主要研究结果如下：　　1 饲料中添加五种外源酶制剂对花鲈幼鱼生长性能、体成分和血清生化指标的影响　　挑选初始均重7.47±0.33 g的花鲈幼鱼576尾，随机划分为6组，每组含4个重复，每个重复含24尾鱼，在56 d饲养期中，分别投喂基础饲料和分别添加175 mg/kg蛋白酶、65 mg/kg脂肪酶、80 mg/kg木聚糖酶、6 mg/kg复合非淀粉多糖酶（木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶各2 mg/kg）和300 mg/kg植酸酶的5种添加饲料，6个组分别标记为Con、Pro、Lip、Xly、NSPe和Phy。结果显示，除Phy组肝体比（HSI）显著提高外，Pro、NSPe和Phy组花鲈生长性能和形体指标无显著改变（P＞0.05）。与Con组相比，Xyl 组花鲈增重率（WGR）、特定生长率（SGR）显著升高（P＜0.05），Lip 组花鲈末均重、WGR、SGR和蛋白质效率（PER）显著降低（P＜0.05），饲料系数（FC）显著升高（P＜0.05）。各组间全鱼干物质（DR）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）及粗灰分（Ash）含量均无显著差异（P＞0.05）。添加组血清胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-CH）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-CH）、尿素（UN）、球蛋白（GLB）和总蛋白（TP）含量及谷草转氨酶（AST）活性均无显著变化（P＞0.05），但 Lip 组谷丙转氨酶（ALT）活性显著升高（P＜0.05）。乳酸脱氢酶（LDH）活性在Pro组显著降低，在Lip、Xyl及Phy组显著升高（P＜0.05）。Lip组血糖（GLU）含量显著降低（P＜0.05），其他各组间无显著差异（P＞0.05）。结果表明，饲料中添加木聚糖酶能提高花鲈幼鱼生长性能，添加脂肪酶呈现相反的作用效果，但却显著提升血清谷丙转氨酶活性并降低血糖含量。　　2饲料中添加五种外源酶制剂对花鲈幼鱼血清免疫和抗氧化指标的影响　　在上述饲养试验结束后，每个重复随机选取 11 尾试验鱼，通过尾部静脉采血制备血清，分析免疫和抗氧化指标。结果显示，Xyl组血清溶菌酶（LZM）活性显著升高（P＜0.05），而在 Lip 以及 NSPe 组却显著降低（P＜0.05）。除木聚糖酶外，外源酶制剂添加均显著提高了血清碱性磷酸酶（AKP）活性（P＜0.05）。蛋白酶、木聚糖酶、复合非淀粉多糖酶和植酸酶显著提升血清超氧化物歧化酶（SOD）活性（P＜0.05），其最高值出现在NSPe组（升高46.1%），Phy组次之（升高42.5%）。五种外源酶制剂的添加均显著提高了血清总抗氧化能力（T-AOC）（P＜0.05），五组升高幅度大小顺序为NSPe＞Phy＞Pro＞Lip ＞Xyl。Lip组血清丙二醛（MDA）含量显著降低（P＜0.05），其他添加组组间差异不显著（P＞0.05）。结果表明，饲料中添加木聚糖酶能显著提高花鲈幼鱼血清溶菌酶活性，五种外源酶制剂的添加均能显著提升血清总抗氧化能力。　　3 饲料中添加五种外源酶制剂对花鲈幼鱼消化酶活性和前肠组织结构的影响　　待上述饲养试验结束后，从每缸随机选取3尾花鲈分别解剖分离并取胃、肠道和肝脏，用于测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。每缸随机选取3尾花鲈，取前肠制作石蜡切片，PAS染色光镜观察。结果显示，与Con组相比，NSPe组胃蛋白酶活性和Xyl、NSPe、Phy组胃淀粉酶活性及Pro、Phy组胃脂肪酶活性分别显著升高（P＜0.05）。各添加组肠道蛋白酶和 Xyl、Phy组肠道淀粉酶及 Pro组肠道脂肪酶活性均显著升高（P＜0.05），NSPe组肠道脂肪酶活性显著降低（P＜0.05）。各添加组肝脏蛋白酶和Xyl、Phy组肝脏淀粉酶及Xyl组肝脏脂肪酶活性均显著升高（P＜0.05），但Pro、Lip及NSPe组肝脏脂肪酶活性显著降低（P＜0.05）。与 Con 组相比，添加组肠道肌层厚度、褶皱高度和宽度无显著差异（P＞0.05），其中Lip组肌层厚度最低（降低14.2%），Pro、Lip和Phy组褶皱高度分别上升14.6%、17.0%和24.9%。结果表明，饲料中分别添加五种外源酶能提高花鲈幼鱼胃肠道、肝脏蛋白酶及淀粉酶活性，蛋白酶、脂肪酶和植酸酶能升高前肠皱褶高度。　　4 饲料中添加五种外源酶制剂对花鲈幼鱼养殖水体氮磷含量的影响　　上述饲养试验结束后，从每个重复随机选取10尾健康花鲈，进行24 h水质试验，测定养殖水体氨氮、总氮和总磷含量。结果显示，与Con组相比，Xyl组水体氨氮含量降低，且在12 h和24h达到显著水平（P＜0.05），而其他酶制剂的添加未对氨氮含量产生显著影响（P＞0.05）。各组间水体总氮含量在24 h内无显著变化，且各组组间差异不显著（P＞0.05）。五种外源酶制剂的添加均降低了水体中总磷含量（P＜0.05），在24 h时Pro、Lip、Xyl、NSPe和Phy组分别降低16.7%、16.7%、13.9%、19.4%和19.4%。结果表明，饲料中分别添加五种外源酶制剂能减少花鲈幼鱼养殖水体中氮磷含量，对养殖水体环境起到改善作用。

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