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目 录
第一章 绪论
1.1 小球藻概述
1.1.1 小球藻概况
1.1.2小球藻的活性成分
1.1.3 小球藻的生理活性
1.1.4小球藻的破碎方法
1.2 蛋白核小球藻的研究现状
1.2.1 蛋白核小球藻的活性成分
1.2.2蛋白核小球藻活性蛋白的研究现状
1.3 脂质代谢疾病的概述
1.3.1 脂质代谢疾病研究背景
1.3.2脂质积累产生的非酒精性脂肪肝病理与成因
1.3.3能量代谢的相关通路
1.4 蛋白及多肽的抗脂肪肝作用
1.4.1 国内外研究进展
1.5 课题研究内容及意义
1.5.1 本课题研究的内容
1.5.2 研究意义
第二章 蛋白核小球藻蛋白酶解多肽制备和抗氧化活性研究
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 材料与试剂
2.2.2 主要仪器设备
2.3 实验过程与方法
2.3.1 凯氏定氮法测定蛋白核小球藻粉中的粗蛋白含量
2.3.2 蛋白核小球藻粉中的粗蛋白提取
2.3.3 抗氧化活性评价
2.3.4 蛋白核小球藻蛋白的酶解及水解物的分子量分布
2.3.5 数理统计
2.4 结果
2.4.1 不同细胞分裂方法的比较
2.4.2 蛋白核小球藻粗蛋白提取率及含量的测定
2.4.3蛋白提取方法优化
2.4.4 粗蛋白的抗氧化活性
2.4.5 酶解水解度及分子量分布
2.4.6 粗多肽的抗氧化活性
2.5 本章小结
第三章 蛋白核小球藻多肽的分离纯化及其活性成分的降脂机制
3.1 前言
3.2 实验材料
3.2.1 材料与试剂
3.2.2主要的仪器设备
3.3 实验过程与方法
3.3.1 主要溶液的配制
3.3.2 各组分酶解多肽的化学法抗肥胖活性评价
3.3.3 各组分酶解多肽的体外细胞抗肥胖活性评价
3.3.4各组分酶解多肽体外肝细胞抗脂肪肝活性评价
3.3.5 凝胶色谱层析
3.3.6 各组分对 3T3-L1 增殖的影响
3.3.7 LC-MS/MS 定义多肽
3.3.8 多肽的合成
3.3.9 合成肽的活性评价
3.3.10 统计分析
3.4 结果
3.4.1铜皂法抗肥胖活性的测定
3.4.2蛋白核小球藻多肽对3T3-L1细胞的增殖影响
3.4.3蛋白核小球藻多肽对3T3-L1细胞的甘油三脂影响
3.4.4蛋白核小球藻多肽对LO2细胞的增殖影响
3.4.5 蛋白核小球藻多肽对油酸 LO2 细胞内 TG的积累影响
3.4.6 碱性蛋白酶酶解蛋白核小球藻多肽经超滤后的脂肪酶抑制活性
3.4.7 碱性蛋白酶酶解多肽的凝胶色谱柱层析结果及活性评价
3.4.8 碱性蛋白酶水解肽 A-II 活性组分分离纯化
3.4.9 碱性蛋白酶中多肽 PP1 中合成肽的 HPLC 和活性预测
3.4.10 碱性蛋白酶中多肽中合成肽的对细胞内蛋白的影响
3.4.11分子对接研究
3.5 本章小结
第四章蛋白核小球藻多肽Ae 对肥胖小鼠体内脂质积累的治疗作用
4.1 前言
4.2 实验材料
4.2.1 实验试剂与材料
4.2.2 实验动物
4.2.3 高脂饲料
4.2.4 仪器与试剂
4.3 实验内容与方法
4.3.1 分组和造模
4.3.2 分血脂分析
4.3.3 氧化酶水平测定
4.3.4 组织学分析
4.3.5 蛋白印迹分析
4.3.6 16S rRNA 测序技术分析肠道菌群
4.3.7 数理统计
4.4 结果
4.4.1 蛋白核小球藻多肽 Ae对脂肪肝小鼠的体重影响
4.4.2 蛋白核小球藻多肽 Ae对脂肪肝小鼠附睾脂肪的影响
4.4.3 蛋白核小球藻多肽 Ae对肝脏及附睾脂肪组织病理改变
4.4.4 蛋白核小球藻多肽 Ae对肠道病变的影响
4.4.5 蛋白核小球藻多肽 Ae对脂肪肝小鼠血脂的影响
4.4.6 蛋白核小球藻多肽 Ae对脂肪肝氧化酶的影响
4.4.7 蛋白核小球藻多肽 Ae对肝脏蛋白表达水平的影响
4.4.8 蛋白核小球藻多肽 Ae对肠道菌群组成的变化
4.5 本章小结
第五章蛋白核小球藻双酶解分离纯化及活性多肽鉴定
5.1 前言
5.2 实验材料
5.2.1 材料与试剂
5.2.2主要的仪器设备
5.3 实验过程与方法
5.3.1 模拟肠胃酶解蛋白核小球藻蛋白
5.3.2 活性多肽组分凝胶质谱分离并 LC-MS/MS 鉴定多肽
5.3.3 多肽的合成
5.3.4 合成肽的活性评价
5.3.5 数理统计
5.4 结果
5.4.1 模拟人体酶解蛋白核小球藻多肽双酶酶解
5.4.2 双酶酶解多肽的凝胶色谱柱层析结果及活性评价
5.4.3 双酶蛋白酶水解肽 TP-IV
5.4.4 TP1 多肽中合成肽的 HPLC 和活性检测
5.5 本章小结
第六章蛋白核小球藻双酶解多肽TPe对脂质代谢的作用
6.1 前言
6.2 实验材料
6.2.1 实验试剂与材料
6.2.2 实验动物
6.2.3 高脂饲料
6.2.4 仪器与试剂
6.3 实验内容与方法
6.3.1 动物分组
6.3.2 分血脂分析
6.3.3 酶水平测定
6.3.4组织学分析
6.3.5 蛋白印迹分析
6.3.6 数理统计
6.4 结果
6.4.1 蛋白核小球藻多肽 TPe对脂肪肝小鼠的体重及食量的影响
6.4.2 蛋白核小球藻多肽 TPe对脂肪肝小鼠皮下及附睾脂肪的影响
6.4.3 蛋白核小球藻多肽 TPe对肝脏组织病理改变
6.4.4 蛋白核小球藻多肽 TPe对肠道病变的影响
6.4.5 蛋白核小球藻多肽 TPe对脂肪肝小鼠血脂的影响
6.4.6 蛋白核小球藻多肽 TPe对脂肪肝氧化酶的影响
6.4.7 蛋白核小球藻多肽 TPe对肝脏蛋白表达水平的影响
6.6 本章小结
结 论
创新点
不足与展望
附 录
参考文献
攻读博士学位期间取得的研究成果
致 谢
答辩决议书
华南理工大学;
