抑制粘着斑激酶表达对口腔鳞癌细胞生物学特性的影响

摘要

目的：研究抑制粘着斑激酶的表达对于口腔鳞癌细胞CAL27生物特性的影响，并初步探究在粘着斑激酶表达被抑制的情况下 X 射线辐照对于口腔鳞癌细胞的杀伤能力是否增强，为今后口腔鳞癌临床治疗方案的选择上提供一定的理论依据。　　材料和方法：用粘着斑激酶抑制剂FAK Inhibitor 14处理口腔鳞癌细胞系CAL27 细胞， X 射线辐照由中科院兰州分院近代物理研究所辐照终端提供。将实验分为正常对照组(C)抑制剂处理组(I)、X射线处理组(X)和抑制剂加X射线处理组(I+X)。分别用Western Blot蛋白印迹法检测相关蛋白的表达，用实时无标记细胞分析系统、克隆形成实验和Ki-67 免疫荧光染色技术检测各实验组细胞的增殖活性，用Transwell迁移实验和划痕实验检测细胞的迁移能力，用Annexin V/ PI双染法流式细胞技术检测各实验组细胞的凋亡情况，用鬼笔环肽荧光染色和原子力显微镜检测细胞骨架及细胞的力学性能变化。　　结果：粘着斑抑制剂处理CAL27细胞后，相较于正常对照组细胞，其增殖活性降低、迁移能力受到显著抑制，与正常对照组相比杨氏模量增加，细胞骨架变少且不规则。加入X射线照射后，抑制剂组显示出更高的凋亡率。抑制剂加X射线照射组的增殖、迁移能力均为各组最低值。　　结论：无论是否添加 X 射线辐照，经过粘着斑激酶抑制剂处理，均能有效降低 CAL27 口腔鳞癌细胞的增殖活性和迁移能力，经过抑制剂干扰的 C AL27细胞比未经处理的对照组细胞在X射线辐照下更易发生凋亡。

目录

声明

中英文缩略词对照表

第一章 绪论

1 .1 口腔鳞状细胞癌

1 .2 斑粘着斑激酶

1 .3 放疗在治疗口腔鳞状细胞癌中的应用

1 .4 研究意义及目的

第二章 粘着斑激酶抑制剂对于口腔鳞癌细胞相关蛋白表达的影响

2 .1 引言

2 .2 实验材料

2.2.1 实验试剂

2.2.2 实验仪器

2 .3 实验方法

2.3.1 细胞培养

2.3.2 蛋白样品制备

2.3.3 蛋白浓度测定

2.3.4 SDS-PAGE凝胶电泳

2 .4 实验结果

2 .5 讨论

第三章 抑制粘着斑激酶的表达对口腔鳞癌细胞增殖活性的影响的影响

3 .1 引言

3 .2 实验材料

3.2.1 实验试剂

3.2.2 实验仪器

3 .3 实验方法

3.3.1 细胞培养

3.3.2 细胞生长曲线分析

3.3.3 克隆形成实验

3.3.4 Ki-67免疫荧光染色

3 .4 实验结果

3.4.1 细胞生长曲线分析

3.4.2 克隆形成实验

3.4.3 Ki-67免疫荧光染色

3 .5讨论

第四章 抑制粘着斑激酶的表达对口腔鳞癌细胞迁移能力的影响

4 .1 引言

4 .2 实验材料

4.2.1 实验试剂

4.2.2 实验仪器

4 .3 实验方法

4.3.1 划痕实验

4.3.2 Transwell 细胞迁移实验

4 .4 实验结果

4.4.1 划痕实验

4.4.2 Transwell 细胞迁移实验

4 .5 讨论

5 .1 引言

5 .2 实验材料

5.2.1 实验试剂

5.2.2 实验仪器

5 .3 实验方法

5 .4实验结果

5 .5讨论

第六章 抑制粘着斑激酶的表达对口腔鳞癌细胞骨架及力学性能的影响

6 .1 引言

6 .2 实验材料

6.2.1 实验试剂

6.2.2 实验仪器

6 .3 实验方法

6.3.1 鬼笔环肽染色细胞骨架

6.3.2 原子力显微镜采集细胞力学数据

6 .4 实验结果

6.4.1 鬼笔环肽染色

6.4.2 原子力显微镜采集细胞杨氏模量

6 .5讨论

第七章 全文总结与展望

参考文献

在学期间的研究成果

致谢

病例汇报