FGFR3在大鼠失神经骨痂中不同时段的表达分析

摘要

目的：FGFR3是成纤维细胞生长因子受体家族成员之一，属于酪氨酸激酶家族，在骨骼发育中起重要作用。如果表达不良，可引起多种全身性疾病。而且，该因子受体的特殊性在于，它是其家族中唯一一个负向调节骨生长的，神经损伤后，该因子受体呈高表达状态，主要在软骨内成骨中起作用。对于神经损伤后产生的病理性骨痂，临床上已经有了充分的宏观认识。本实验旨在通过制作大鼠失神经胫骨骨折模型，利用这一因子受体的负向调控作用，并注射FGFR3抑制剂，探究在骨折愈合过程中这一因子受体的作用，对骨痂微观结构的影响及表达变化规律。希望通过该研究改善因失神经产生的一些不良影响，加深对失神经下病态骨痂的了解，为进一步研究提供参考，为将来理解和治疗此类骨折提供理论指导。　　方法：选用60只雌性SD大鼠，随机分为两组，实验组、对照组。实验组制作坐骨神经损伤的胫骨横形骨折模型，术后腹腔注射FGFR3阻滞剂；对照组模型与实验组完全一致，术后给等剂量生理盐水。分别在术后4、7、10、14、21d时处死，随后拍摄X线片取标本（各时间点每组=6只），首先进行骨密度扫描，然后固定、脱钙后，取骨折线上下4mm的一段胫骨标本，用石蜡包埋，切成5um厚切片，对每个标本均行HE染色，Masson三色法染色，行病理组织学分析。用图形分析软件采集病理照片中骨痂生长情况的相关数据，并对实验数据行系统的统计学分析。　　结果：相比于对照组，实验组的骨折愈合加速，骨小梁数目较多，骨折周围骨痂密度显著增高，骨痂的改建、塑形加快，有统计学差异（P＜0.05）。FGFR3的表达变化呈现一定的规律性，各组数据均表明，该因子受体在骨折后7-14天时间段表达最为活跃。　　结论：FGFR3有明显抑制在失神经骨折愈合的过程中骨痂生长及成熟的作用。抑制FGFR3在周围神经失神经情况下能够加快骨折愈合，促进骨痂的塑形。同时，该因子受体表达有时间特异性，在骨折后7-14天是其表达高峰时段。

目录

声明

第一章 前言

1.1 骨折合并神经损伤的特点

1.2 骨折愈合过程

1.3 认识FGFR3

1.4 大鼠选择及神经解剖

1.5 在周围神经损伤下研究FGFR3的实验设计思路

1.6 骨痂与病理染色的显色原理

第二章 实验材料和方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 实验试剂与仪器

2.1.3 主要试剂配制

2.2 实验方法

2.2.1 动物分组情况

2.2.2 模型建立

2.2.3 制备标本

2.2.4 石蜡包埋，制作病理切片

2.2.5 图像采集

2.2.6 骨形态计量分析

2.2.7 数据的统计学分析

第三章 实验结果

3.1 实验模型及整体结果

3.2 影像结果

3.2.1 X线检查结果

3.2.2 骨密度扫描结果

3.3 HE染色下的骨细胞和骨小梁定量测量分析

3.3.1 病理标本的处理

3.3.2 病理所见及病变趋势

3.3.3 数据处理

3.3.4 Masson三色法染色下对骨痂纤维化成熟程度进行定量测量分析

第四章 讨论

第五章 结论

5.1 主要结论

5.2 研究展望

参考文献

文献综述:失神经骨折愈合机制的研究进展

缩略语表

在学期间的研究成果

致谢