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不同浓度的亚麻籽油和缩合单宁对湖羊十二指肠结构和Pep T1表达的影响

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龙骨

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缩略词表

第一章 文献综述

1.1亚麻籽油

1.2 缩合单宁

1.3 Pep T1

1.4 目的与意义

第二章 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

第三章结果

3.1 不同浓度缩合单宁和亚麻籽油对湖羊十二指肠结构的影响

3.2 不同浓度缩合单宁和亚麻籽油对湖羊十二指肠上Pep T1表达的影响

3.3 湖羊十二指肠上Pep T1的分子进化特征

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

在学期间的研究成果

致 谢

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摘要

为了探讨不同浓度的亚麻籽油和缩合单宁对湖羊十二指肠结构和 PepT1 表达的影响,本研究选择30只湖羊断奶公羔,饲喂结束后,对湖羊十二指肠进行各项试验指标检测。苏木精-伊红(HE)染色观察十二指肠各层结构的形态学变化;扫描电镜观察十二指肠微绒毛的形态学变化;免疫组织化学法和Western blotting检测PepT1 蛋白在湖羊十二指肠上的分布和表达量;并对湖羊PepT1进行了生物信息学分析。  结果:  1. HE结果显示,在只添加缩合单宁和不添加亚麻籽油的情况下,随着添加缩合单宁浓度的升高,湖羊十二指肠的厚度会增加。当在湖羊日粮中同时添加4%的亚麻籽油和不同浓度的缩合单宁后,湖羊十二指肠的厚度也会增加。  2. HE结果显示,在不添加4%亚麻籽油情况下,随着添加缩合单宁量的增加,湖羊十二指肠黏膜层的厚度逐渐增加。当添加4%的亚麻籽油,随着添加缩合单宁浓度的升高,湖羊十二指肠的黏膜层厚度有增加的趋势。  3. 扫描电镜结果表明,在湖羊饲料只添加缩合单宁的情况下,其十二指肠微绒毛的长度,除添加浓度为0.2%与添加浓度为0.4%有显著差异外,不添加缩合单宁和添量为0.4%缩合单宁之间没有显著性差异。在添加4%的亚麻籽油后,随着在饲料中添加的缩合单宁浓度的升高,湖羊十二指肠微绒毛的长度均没有显著性差异,但有减小的趋势。  4. 免疫组化结果显示,湖羊十二指肠上Pep T1主要表达在十二指肠肠绒毛上的柱状吸收细胞纹状缘上,从图中可以看出,在不添加亚麻籽油的情况下,随着缩合单宁浓度的升高,Pep T1的表达量有上升的趋势;当在饲料中添加4%的亚麻籽油和0.2%的缩合单宁后,相比只添加4%亚麻籽油的Pep T1的量又升高趋势,但随着饲料中缩合单宁的浓度升高到0.4%,Pep T1的表达量又有下降的趋势。  5. 生物信息学分析结果表明,湖羊PepT1与绵羊的同源性为99.9%,与山羊的同源性为98.8%,与家牛和牦牛的同源性均为96.2%,与穴兔的同源性最低为80.0%,湖羊与Ovis aries的核苷酸有两个地方不同,分别是1,673位和2,013位,在1,673位湖羊是G,而绵羊是C,反应在氨基酸上是第558位的氨基酸发生改变,即湖羊的是S,而绵羊的是T。在2,103位虽然发生了核苷酸的改变,但反应在氨基酸上没有变化。  结论:  1. 在饲料中添加0.4%的缩合单宁是最适宜小肽转运的。  2. 给湖羊饲料中添加 4%的亚麻籽油和 0.2%的缩合单宁对湖羊的成长是最适宜的。  3. 与普通绵羊相比,湖羊十二指肠上位于Pep T1胞外结构域之间第558位氨基酸发生了变化,可能对小肽的运输产生影响。

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