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油柰PsWRKY22和PsWRKY33启动子的分离及其活性分析

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一 引 言

1.1 文献综述

1.1.1 油柰的研究进展

1.1.2 WRKY转录因子的研究进展

1.1.3 启动子的研究进展

1.2 研究背景与意义

1.3 研究内容

1.4 研究的技术路线

二 材料与方法

1 试验材料

1.1 植物材料

1.2 菌株与质粒

1.3 酶与各种生化试剂

1.4 PCR引物合成

2 方 法

2.1 油柰基因组DNA提取

2.2 PsWRKY22/33基因启动子克隆分离

2.3 启动子顺式作用元件分析

2.4 启动子各缺失片段载体构建

2.5 农杆菌转化冻融法

2.6 启动子各片段载体在拟南芥中的功能验证

2.7 胁迫处理

2.8 GUS组织化学染色分析

2.9 GUS酶活性的测定

三 结果与分析

1 PsWRKY22和PsWRKY33启动子的分离及序列分析

1.1 PsWRKY22启动子的分离及序列分析

1.2 PsWRKY33启动子的分离及序列分析

2 启动子的载体构建

2.1 PsWRKY22启动子及缺失片段表达载体的构建

2.2 PsWRKY33启动子及缺失片段表达载体的构建

3 转基因拟南芥植株筛选

3.1 pPsWRKY22转基因拟南芥植株筛选

3.2 pPsWRKY33转基因拟南芥阳性植株筛选

4 组织GUS染色

4.1 pPsWRKY22组织GUS染色

4.2 pPsWRKY33组织GUS染色

5 不同胁迫处理下的GUS染色和活性测定

5.1 pPsWRKY22在不同胁迫处理下的GUS染色和活性测定

5.2 PsWRKY33启动子在不同逆境胁迫下的表达分析

讨 论

结 论

参考文献

附 录

附 录A 培养基及营养液配方

附 录B 本研究所用的载体图谱

附 录C PsWRKY22和PsWRKY33基因启动子序列

攻读学位期间的学术论文与研究成果

致 谢

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著录项

  • 作者

    陈永萍;

  • 作者单位

    福建农林大学;

  • 授予单位 福建农林大学;
  • 学科 园艺学;果树学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 陈桂信,刘志钦;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

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