在L02和HepG2细胞中鉴定UHRF2磷酸化修饰差异位点以及研究其相关的生物学功能

目录

声明

符号说明

前言

1实验材料与方法

1.1实验材料

1.1.1细胞株、质粒

1.1.2主要实验试剂

1.1.3主要实验仪器

1.2 实验方法

1.2.1 质粒制备

1.2.2 细胞培养及转染

1.2.3 蛋白提取

1.2.4蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测

1.2.5 质谱检测实验

1.2.6 流式细胞术检测细胞增殖周期

1.2.7 泛素化实验

1.2.8免疫荧光染色（Immunofluorescence staining，IF）实验

1.2.9 酶切及琼脂糖凝胶电泳

1.2.10统计学分析

2结果

2.1 LC-MS/MS检测UHRF2磷酸化差异位点

2.1.1 验证p3×Flag-CMV-10-UHRF2质粒

2.1.2 LC-MS/MS检测UHRF2磷酸化修饰差异位点

2.2 构建UHRF2磷酸化位点突变体质粒及其验证

2.3 UHRF2磷酸化位点突变对细胞增殖周期的影响

2.4 UHRF2磷酸化位点突变对UHRF2定位的影响

2.5 UHRF2磷酸化位点突变对TIP60相关蛋白表达的影响

2.6 UHRF2磷酸化位点突变对自身泛素化的影响

3讨论

参考文献

文献综述:蛋白质磷酸化修饰的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表论文情况