原发性免疫缺陷病中WAS蛋白调控记忆T的形成与功能维持及SCN患儿粒细胞功能研究

目录

声明

英汉缩略语名词对照

第一部分 WAS蛋白调控效应CD8+T细胞向记忆CD8+T细胞的转换及功能维持

前言

1实验材料

1.1材料与设备

1.2实验用细胞及病毒

1.3实验用抗体

2实验方法

2.1鼠尾DNA提取

2.2小鼠DNA PCR及DNA电泳鉴定

2.3 LCMV-Armstrong病毒的培养及感染

2.4 Lm-GP33细菌培养及感染

2.5取小鼠脾脏淋巴细胞

2.6尾静脉取小鼠全血淋巴细胞

2.7表面标记流式染色

2.8核内标记流式染色

2.9 GP33 Tetramer流式染色

2.10 ANNEXIN V 流式染色

2.11记忆CD8+T细胞过继转移

2.12骨髓嵌合小鼠的制备

2.13数据分析

3结果

3.1 WAS缺陷小鼠高效的T细胞克隆扩增及效应T细胞分化

3.2 WAS缺陷小鼠GP33特异性CD8+T细胞在收缩及记忆形成早期阶段部分受损

3.3 WAS缺陷小鼠GP33特异性CD8+T细胞在记忆维持阶段降低，耗竭T增高

3.4 WAS缺陷小鼠胸腺CD8输出正常，抗原特异性CD8+T细胞通过外源性途径死亡增多

3.5 WAS缺陷小鼠GP33特异性CD8+T细胞再次应答时扩增能力降低，保护性反应减弱

3.6 WASP内源性调控GP33特异性CD8+T细胞记忆的形成

4讨论

参考文献

第二部分 两例先天性中性粒细胞减少症患儿及其嵌合父亲粒细胞功能研究

前言

1实验材料与方法

1.1材料与设备

1.2实验方法

1.3中性粒细胞弹力蛋白酶表达测定

1.4 NADPH含量测定

2结果

2.1病人一般情况及临床表现

2.2确诊病人ELANE基因突变及父亲嵌合

2.3病人及嵌合父亲粒细胞内源性活性氧检测及NADPH组成分析

2.4病人粒细胞胞浆中突变的中性粒细胞弹力蛋白酶表达增多，嵌合父亲粒细胞该蛋白表达正常

3讨论

参考文献

全文总结

一、全文小结

二、不足与改进

文献综述:WAS 综合征的临床表现及病理生理机制

致谢

攻读学位期间科研情况介绍