重型肝炎预后相关蛋白质质谱分析及预测模型构建

摘要

目的：本研究旨在通过应用 SELDI-TOF-MS(surface enhanced laser desorption/ionization time-of flight mass spectrometry)技术获得HBV相关重型肝炎不同临床结局患者和正常人血浆中的蛋白质指纹图谱，筛选出与重型肝炎患者预后相关的差异蛋白，并利用这些差异蛋白初步构建重型肝炎的预后预测模型，为重型肝炎预后判断提供可靠的、敏感的指标。　　方法：收集西南医科大学附属医院感染科住院部HBV相关重型肝炎患者35例和我院体检中心健康志愿者15例的血浆标本，分别作为实验组和对照组。同时收集患者的人口学资料和临床资料（包括肝功能、凝血功能等）。实验组患者随访时间至少12周。根据随访患者病情的转归不同分为死亡组和存活组。应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测HBV相关重型肝炎患者和正常健康人血浆样本，获得弱阳离子交换芯片CM10的蛋白质指纹图谱。使用ProteinChip3.2软件和BiomarkerWizard软件识别蛋白指纹图谱，并利用SPSS16.0软件对所采集的数据进行统计学分析，利用Biomarker Patterns(BPS5.0)软件采用树形分类方法对HBV相关重型肝炎患者初步建立预后预测模型，并计算该模型对 HBV相关重型肝炎患者预后判断的敏感性和特异性。计量资料采用均数±标准差（x±s）描述。组间比较采用两个独立样本t检验。以P＜0.05示有统计学意义。　　结果：CM10蛋白芯片检测结果显示，HBV相关重型肝炎患者和健康对照组血浆样本在蛋白分子量1000Da-50000Da的范围内一共检测出57个蛋白峰表达水平有差异，其中与健康对照组相比较，重型肝炎存活组有25个蛋白峰表达有显著差异（P＜0.05），其中有6个蛋白峰显著升高，它们是M2017_57、M7568_86、M7937_87、M15109_0、M15268_2、M15845_0；有19个蛋白峰显著降低，它们是M2196_71、M2235_78、M2747_23、M2796_85、M2881_48、M2913_26、M3224_17、M3322_84、M4309_41、M6437_01、M6634_84、M6839_64、M8601_12、M9185_56、M28057_7、M33395_2、M34404_9、M44842_1、M45146_8。重型肝炎死亡组有24个蛋白峰表达有显著差异（P＜0.05），其中有6个蛋白峰显著升高，它们是M2017_57、M6634_84、M7568_86、M7937_87、M15268_2、M15845_0；有18个蛋白峰显著降低，它们是M2235_78、M2747_23、M2881_48、M2913_26、M3224_17、M3322_84、M3376_49、M4309_41、M5908_26、M6437_01、M6584_63、M6839_64、M8601_12、M14670_8、M15109_0、M28057_7、M33395_2、M34404_9。重型肝炎存活组和死亡组比较发现有16个蛋白峰表达有显著差异（P＜0.05），它们分别是M3376_49、M3479_65、M3492_79、M3936_56、M5649_11、M7568_86、M7766_46、M7937_87、M8601_12、M9290_44、M11692_6、M14670_8、M15109_0、M15268_2、M15845_0、M45146_8。应用Biomarker Patterns软件对重型肝炎存活组和死亡组之间有统计学意义的蛋白峰进行比较分析，并最终筛选出5个差异蛋白峰组成树形决策模型。这5个差异蛋白峰分别是 M3492_79、M5649_11、M3936_56、M7568_86和M8601_12，所建立的模型对重型肝炎预后判断的敏感性为72.00％，特异性为100.00%。　　结论：　　1.应用SELDI-TOF-MS技术可以发现HBV相关重型肝炎发生、发展过程中某些蛋白质表达水平有差异，不同临床结局的重型肝炎患者血浆蛋白峰表达差异比较显著。　　2.利用这些差异蛋白峰构建的预后预测模型对HBV相关重型肝炎患者的临床结局判断有着重要的意义，并提示这些差异表达的蛋白质可能和 HBV相关重型肝炎预后关系密切，但尚需进一步研究证实。

目录

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1 临床病历资料

2 重型肝炎患者和健康对照组血浆蛋白质指纹图谱比较

3 建立分类模型

讨论

结论

参考文献

中英文缩写对照表

致谢

综述：肝衰竭预后预测模型及指标的研究进展

附：攻读硕士学位期间撰写发表的论文和会议投稿情况

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