载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后神经保护作用的影响研究

摘要

目的：创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)后血脑屏障（blood brain barrier, BBB）破坏，炎症反应和脑组织葡萄糖摄取障碍等是影响患者预后的主要因素。本研究通过构建小鼠控制性皮质损伤(controlled cortical impact，CCI)模型探讨外源性载脂蛋白E（apolipoprotein e，apoE）拟肽COG1410对小鼠运动功能，脑水肿，脑组织血管再生，炎症因子表达和葡萄糖摄取的影响。　　方法：采用控制性气压冲击法构建CCI模型。将C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为正常组、假手术操作组、等渗盐水治疗组、COG1410治疗组。COG1410治疗组为创伤后每24小时予以尾静脉注射apoE拟肽COG1410，等渗盐水治疗组为创伤后每24小时予以尾静脉注射等渗盐水;创伤后第1，3，7天，采用Rotarod test，伊文思蓝法，干湿重法，ELISA，免疫组化，7.0 T MRI和Inveon-micro-PET/CT等分别检测小鼠运动功能，BBB通透性，脑组织含水量(brain water content，BWC)，脑组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和炎症因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达量，脑组织血管再生，脑水肿体积和脑组织葡萄糖摄取等情况。　　结果：⑴ApoE拟肽COG1410改善CCI后小鼠运动功能障碍。CCI导致小鼠运动功能显著降低，在创伤后第1天达到最低值;应用COG1410后显著改善小鼠运动功能障碍，在创伤后第7天小鼠运动功能基本恢复正常。⑵ApoE拟肽COG1410减轻CCI后小鼠脑水肿。CCI导致小鼠BBB通透性显著升高，伊文思蓝外渗增加，脑组织含水量和脑水肿体积均显著升高;应用COG1410后显著降低BBB通透性，减少伊文思蓝外渗和脑水肿体积并降低脑组织含水量。⑶ApoE拟肽COG1410抑制CCI后小鼠脑组织血管内皮生长因子表达和血管再生。CCI后第1天小鼠脑组织VEGF表达即显著升高，在创伤后第3天其表达量达到最高峰，7天时基本恢复正常;而血管再生在CCI后第3天显著增多。应用COG1410后显著抑制脑组织VEGF表达并一定程度抑制血管再生。且CCI后新生微血管与正常脑组织微血管存在显著的形态学差异，CCI后新生微血管呈芽状或细线状，而正常脑组织微血管呈环状。⑷ApoE拟肽COG1410抑制CCI后小鼠脑组织肿瘤坏死因子-α表达。CCI后小鼠脑组织TNF-α表达迅速升高，在创伤后第3天基本恢复正常。应用COG1410后显著抑制脑组织TNF-α表达。5.ApoE拟肽COG1410提高CCI后小鼠脑组织葡萄糖摄取。CCI导致小鼠脑组织创伤灶周围及伤侧大脑半球葡萄糖摄取值显著降低，应用COG1410后显著提高创伤灶周围及伤侧大脑半球葡萄糖摄取值。　　结论：apoE拟肽COG1410能有效减轻CCI后BBB破坏，炎症反应和脑水肿，提高脑组织葡萄糖摄取，并改善运动功能障碍，具有潜在的临床应用价值。

目录

摘要

前言

第一节 载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后小鼠运动功能的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第二节 载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后小鼠脑水肿的影响

1．1 实验材料

1．2 主要实验试剂

1．3 主要实验仪器

1．4 实验方法

1．5 药物注射

1．6 统计学分析

2 结果

3 讨论

第三节 载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后小鼠脑组织血管内皮生长因子表达和血管再生的影响

1．1 实验材料

1．2 主要实验试剂

1．3 主要实验仪器

1．4 实验方法

1．5 药物注射

1．6 统计学分析

2 结果

3 讨论

第四节 载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后小鼠脑组织肿瘤坏死因子-α的影响

1．1 实验材料

1．2 主要实验试剂

1．3 主要实验仪器

1．4 实验方法

1．5 药物注射

1．6 统计学分析

2 结果

3 讨论

第五节 载脂蛋白E拟肽COG1410对创伤性脑损伤后脑组织葡萄糖摄取的影响

1．1 实验材料

1．2 主要实验试剂

1．3 主要实验仪器

1．4 实验方法

1．5 药物注射

1．6 统计学分析

2 结果

3 讨论

第六节 总结

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

The Therapeutics Progress of Apolipoprotein-E Mimetic Peptide in Traumatic Brain Injury

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