二甲双胍逆转肺腺癌耐厄洛替尼细胞株A549ER耐药性

摘要

背景：　　权威医学期刊《CA:A Cancer Journal for Clinicians》2015年最新发表的全球癌症统计显示肺癌在全球范围内无论发病还是致死均高居榜首。以厄洛替尼为代表的靶向治疗为肺癌的临床治疗提供了新的选择，其确切的治疗效果使其开始被作为一线化疗药物来研究和使用。然而如同其他的化疗药物一样，耐药成为影响其治疗效果的瓶颈。　　二甲双胍是一种双胍类口服降糖药物，已被广泛用于2型糖尿病(T2DM，type2diabetes mellitus)的治疗。长期的临床使用证实其良好的安全性，单纯使用二甲双胍治疗极少引发低血糖的不良反应。最近有研究表明，二甲双胍除了明确的降糖作用，还被发现具有抗肿瘤作用和辅助改善化疗药物敏感性。本研究拟采用二甲双胍联合化疗的方法观察耐厄洛替尼肺癌细胞株对厄洛替尼的耐药性的变化。　　目的：　　探究二甲双胍对人肺腺癌耐厄洛替尼细胞A549ER是否具有耐药逆转作用。　　方法：　　1采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测厄洛替尼对A549ER细胞和A549细胞的IC50(half maximal inhibitory concentration，半抑制浓度)，并据此计算出A549ER细胞的耐药倍数。　　2采用CCK-8法检测二甲双胍对A549ER细胞和A549细胞的生长抑制作用。根据不同的培养条件对A549ER细胞和A549细胞进行分组，检测厄洛替尼对联合作用组A549ER的IC50，并计算逆转倍数。　　3采用流式细胞术检测各组A549ER细胞的凋亡率及细胞周期，并计算增殖指数。　　结果：　　1 A549ER细胞及A549细胞的厄洛替尼IC50分别为118.8μmol/L和15.15μmol/L。计算得出A549ER细胞对厄洛替尼的耐药倍数为7.84。　　2二甲双胍抑制A549细胞及A549ER生长。浓度低于5mmol/L，二甲双胍对两种细胞具有相似的生长抑制率;当浓度在5mmol/L到20mmol/L范围时，二甲双胍对A549ER细胞的生长抑制率较高(P＜0.01)。联合用药组厄洛替尼IC50为73.55μmol/L，对厄洛替尼的耐药倍数为4.85。A549ER细胞对厄洛替尼耐药性被二甲双胍逆转了1.62倍。　　3联合用药组A549ER细胞凋亡率为(16.92±1.20)％，较二甲双胍组[(10.25±4.23)％，P＜0.05]、厄洛替尼组[(7.51±3.73)％，P＜0.01]、空白对照组[（5.53±3.00）％，P＜0.01]均显著升高。而增殖指数以联合用药组最低，为0.60±0.09。其他三组分别为二甲双胍组0.73±0.08，厄洛替尼组0.78±0.10，空白对照组0.84±0.15。　　结论：　　1 A549ER细胞对厄洛替尼具有耐药性。　　2二甲双胍抑制A549ER细胞及A549生长。二甲双胍对A549ER细胞对厄洛替尼的耐药性具有逆转作用。　　3二甲双胍促进A549ER细胞的凋亡、抑制细胞的增殖、减缓细胞周期进程。　　4促进细胞凋亡、抑制细胞生长和增殖，以及减慢细胞周期进程等可能是二甲双胍逆转厄洛替尼耐药性的方式。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

第一章 前言

第二章 耐厄洛替尼细胞株A549ER的培养及耐药性检测

2．1 材料与方法

2．2 结果

2．3 讨论

第三章 二甲双胍对A549ER细胞及A549细胞生长的影响及对A549ER细胞厄洛替尼耐药性的逆转作用

3．1 材料与方法

3．2 结果

3．3 讨论

第四章 二甲双胍逆转耐厄洛替尼细胞A549ER耐药性机制的研究

4．1 材料与方法

4．2 结果

4．3 讨论

全文结论

参考文献

文献综述 二甲双胍与肿瘤的流行病学研究

攻读硕士期间发表的文章

致谢