EIAV新编码蛋白S4的鉴定及其功能研究

目录

声明

主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 马传染性贫血病

1.1.1 马传染性贫血病概述

1.1.2 EIAV病毒粒子结构与构成

1.1.3 EIAV的基因及其编码蛋白

1.2 EIAV的生命周期

1.2.1 病毒入侵与脱衣壳

1.2.2 反转录与整合

1.2.3 转录与翻译

1.2.4 包装与出芽

1.3 天然免疫限制因子tetherin的研究进展

1.3.1 tetherin 的概述

1.3.2 tetherin 的分子特征

1.3.3 tetherin 的抗病毒作用机制

1.3.4 tetherin 的拮抗蛋白

1.4 本研究的目的与意义

第二章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 细胞与毒株

2.1.2 实验所用仪器

2.1.3 实验所用试剂

2.1.4 实验所用抗体

2.1.5 实验所用质粒

2.1.6 引物

2.1.7 试剂配制

2.2 方法

2.2.1 马巨噬细胞的分离培养

2.2.2 细胞总RNA的提取与反转录

2.2.3 普通PCR与定点突变PCR反应

2.2.4 目的片段与载体的连接

2.2.5 转化

2.2.6 质粒提取

2.2.7 组织细胞DNA提取

2.2.8 胶回收

2.2.9 Q-PCR

2.2.10 siRNA干扰实验

2.2.11 huTHN guideRNA引物的设计和质粒的构建

2.2.12 huTHN基因敲除细胞系的构建

2.2.13 细胞转染

2.2.14 western blotting

2.2.15 激光共聚焦检测

2.2.16 双分子荧光互补技术（BiFC）

2.2.17 免疫共沉淀

2.2.18 多克隆抗体的制备

2.2.19 血清抗体效价检测

2.2.20 抗体纯化及效价检测

2.2.21 抗体反应性检测

2.2.22 反转录酶（RT酶）活性检测

2.2.23 数据分析

第三章 主要研究结果

3.1 EIAV新编码蛋白S4的克隆与鉴定

3.2 EIAV S4兔多克隆抗体的制备

3.3 EIAV S4可以促进病毒的释放

3.4 EIAV S4拮抗tetherin对于病毒的限制作用

3.5 EIAV S4可以降低细胞表面tetherin的表达

3.6 EIAV S4与tetherin存在相互作用

3.7 EIAV S4与tetherin共定位于TGN

3.8 EIAV S4拮抗tetherin的机制研究

3.9 EIAV S4可能影响tetherin的某种修饰

第四章 讨论

第五章 全文结论

参考文献

致谢

作者简历