声明
摘要
符号说明
第一章绪论
1．1人乳头瘤状病毒 (HPV) 概述
1．1．1人乳头瘤状病毒 (HPV) 结构
1．1．2人乳头瘤状病毒 (HPV) 基因组与功能
1．1．3 HPV病毒分型
1．1．4 HPV与肿瘤的关系
1．1．5 HPV的致病机理
1．1．6 HPV病毒载量与宫颈癌的关系
1．1．7 HPV分型检测的意义
1．1．8 HPV L1蛋白检测的意义
1．1．9 HPV分型联合HPV L1蛋白检测的意义
1．1．10 HPV检测方法
1．2基质辅助激光解吸飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)
1．2．1 MALDI TOF MS基本原理
1．2．2 MALDI电离机理
1．2．3 MALDI-TON-MS的应用
1．3本论文研究的目的、意义和主要内容
1．3．1本论文研究目的和意义
1．3．2本论文研究内容
第二章高效富集寡核苷酸纳米材料的制备
2．1引言
2．2实验部分
2．2．1试剂与仪器
2．2．2精胺修饰纳米金刚石的制备
2．2．3红外光谱和红外成像的表征
2．2．6 MADLI-TOF MS分析
2．3结果与讨论
2．3．1 SP-NDs的表征
2．3．2 SP-NDs对寡核苷酸的吸附
2．3．2 MALDI TOF MS分析稀溶液寡核苷酸
2．3．4 MALDI TOF MS分析复杂基体中的寡核苷酸
2．4本章小结
第三章基于纳米材料高效富集质谱法对HPV病毒分型研究
3．1引言
3．2实验部分
3．2．1试剂与仪器
3．2．2 HPV通用引物PCR扩增
3．2．3巢式PCR-RFLP方法
3．2．4临床样品DNA提取
3．2．5 MALDI TOF MS检测酶切产物
3．2．6试剂盒检测临床样本
3．3结果与讨论
3．3．2 MALDI TOF Ms对HPV分型检测
3．3．3临床样品验证结果
3．4本章小结
第四章基于纳米金非共价键竞争吸附质谱法定量检测HPV16 L1蛋白
4．1引言
4．2实验部分
4．2．1试剂与仪器
4．2．2纳米金的合成
4．2．3纳米金表征
4．2．4纳米金聚集盐的浓度
4．2．5 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合
4．2．7 Mass Tag的筛选
4．2．8 HPV 16 L1蛋白的检测
4．2．9样本检测
4．2．10方法学验证
4．2．11酶联免疫试剂盒检测样本
4．3结果与讨论
4．3．1纳米金的表征
4．3．2纳米金聚集盐的浓度
4．3．3 AuNPs吸附Aptamer条件
4．3．4 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合物的裹征
4．3．5质量标签(Tag)的筛选
4．3．6 MALDI TOF MS条件
4．3．7 HPV 16 L1蛋白的检测
4．3．8方法分析表现
4．3．9实际样品的定量分析
4．3．10 ELISA实验验证
4．3本章小结
第五章基于氧化石墨烯和核酸适配体竞争吸附检测HPV 16 L1蛋白
5．1引言
5．2实验部分
5．2．1试剂与仪器
5．2．2离心时间
5．2．3氯化钠浓度
5．2．4 HPV 16 L1核酸适配体浓度
5．2．8基于核酸适配体与GO检测体系Zeta电势和颗粒尺寸分布研究
5．3结果与讨论
5．3．1离心时间的影响
5．3．2氯化钠浓度的影响
5．3．4 HPV 16 L1蛋白检测
5．3．5实际临床样本检测
5．3．6回收率
5．3．7特异性实验
5．3．8 GO／HPV 16 L1核酸适配体检测体系颗粒尺寸的分布研究
5．3．9HPV 16 L1核酸适配体和GO检测体系Zeta电势分布
5．3．10与第四章所建立的方法比较
5．4本章小结
第六章结论与展望
参考文献
致谢
研究成果及发表的学术论文
作者和导师简介
北京化工大学;
