特异性环氧化酶抑制剂对低氧高二氧化碳肺动脉高压的影响及红花注射液保护机制的探讨

摘要

目的：探讨大鼠在慢性低氧高二氧化碳环境下,特异性环氧化酶抑制剂对肺动脉高压的影响及红花注射液的保护机制. 方法：将二级雄性sprague-Dawley(SD)大鼠40只,体重(180-220)g,随机分为四组,正常对照组(A组),慢性低O<,2>高CO<,2>四周组(B组),慢性低O<,2>高CO<,2>四周+西乐葆用药组(C组),慢性低O<,2>高CO<,2>四周+红花注射液用药组(D组),每组10只.慢性低O<,2>高CO<,2>四周组置于常压低氧高二氧化碳舱内,充入N<,2>使O<,2>浓度维持在9.0﹪_11.O﹪,CO<,2>浓度维持在5.0﹪-6.5﹪.舱内置无水CaCL<,2>吸收水蒸气,每天8小时,每周6天,连续4周:慢性低O<,2>高CO<,2>四周+西乐葆用药组,每次低O<,2>高CO<,2>前予西乐葆(0.5mg.kg<'-1>.d<'-1>)灌胃,其它条件同B组:慢性低O<,2>高CO<,2>四周+红花注射液用药组,每次低O<,2>高CO<,2>前予红花注射液(2ml.kg<'-1>.d<'-1>)腹腔注射,其它条件同B组.实验4周后,大鼠用戊巴比妥钠(35mg.kg<'-1>)腹腔麻醉,自颈外静脉插管测平均肺动脉压(mPAP),颈总动脉插管测平均颈动脉压(mCAP).放免法测定血浆和肺匀浆TXB<,2>和6-keto-PGF<,1α>浓度;免疫组化法测定肺细小动脉COX-1、COX-2含量;组织原位杂交法测定肺细小动脉COX-1mRNA、COX-2mRNA表达的变化;光镜下测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT)反映肺血管重建情况;电镜观察肺细小动脉超微结构. 结果：(1)B组mPAP显著高于A组,c组与B组无显著性差异,D组的mPAP显著低于B组;C组mCAP显著高于其它三组,A、B、D组间mCAP比较差异无显著性.(2)血浆和肺匀浆TXB<,2>、6-keto-PGF<,1α>浓度以及TxB<,2>/6-keto-PGF<,1α>比值B组比A组显著增高;c组与B组相比血浆和肺匀浆6-keto-PGF<,1α>显著降低,TXB<,2>/6-keto-PGF<,1α>比值显著增高;D组与B组相比血浆和肺匀浆TXB<,2>显著下降,TXB<,2>/6-keto-PGF<,1α>比值显著下降.(3)光镜下B组与A组相比,肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)和肺细小动脉中膜厚度(PAMT)均显著增高;C组WA/TA和PAST与B组无显著差异;D组与B组相比显著降低.(4)电镜下B组大鼠肺细小动脉内皮细胞吞饮小泡增多,血管壁增厚,中膜平滑肌细胞增生,纤维细胞增多,胶原纤维密集,管腔明显狭窄,肺泡Ⅱ型上皮细胞微绒毛脱落,板层小体空泡状;C组中膜平滑肌细胞增大、增多,胞浆肌丝丰富,平滑肌细胞间隙增宽,肺泡隔胶原纤维增生明显;D组与B组比较明显减轻,平滑肌细胞肌丝清,色深,纤维细胞少,胶原纤维减少,肺泡Ⅱ型上皮细胞微绒毛丰富、结构清、板层小体染色深.(5)免疫组化和原位杂交均发现B组肺动脉管壁COX-1、COX-2含量和基因表达皆显著高于A组;C组与B组相比,COX-1无显著差异,COX-2显著降低;D组与B组比较差异无显著性. 结论：TXA<,2>和PGI<,2>平衡失调可能在慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压形成中起重要作用.西乐葆可能有加重慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压和肺血管结构重建倾向,过度抑制COX-2,使TXA<,2>/PGI<,2>比值升高可能是其作用机制之一.红花注射液有减轻慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压和肺血管结构重建的作用,可能与抑制TXA<,2>的合成,保护内皮细胞,抑制血小板聚集,TXA<,2>/PGI<,2>比值降低有关.

目录

缩略词表

前言

材料和方法

一.实验动物

二.主要仪器及试剂

三.动物模型制备及分组

四.肺动脉压力和颈动脉压力的测定

五.光镜标本制作及观察

六.电镜标本制作及观察

七.血浆及肺组织TXB2含量测定

八.血浆及肺组织6-keto-PGF1a含量测定

九.COX-1和COX-2的免疫组织化学检测

十.COX-1mRNA和COX-2mRNA的原位杂交检测

十一.统计学处理

结果

一.各组大鼠mPAP、WA/TA、PAMT和mCAP的比较

二.慢性低O2高CO2和西乐葆组、红花组对大鼠肺细小动脉显微结构的影响

三.慢性低O2高CO2和西乐葆组、红花组对大鼠肺细小动脉超微结构的影响

四.各组大鼠血浆、肺匀浆TXB2、6-keto-PGF1α含量及TXB2/6-keto-PGF1α的比较

五.各组大鼠肺细小动脉COX-1、COX-2及COX-1mRNA、COX-2mRNA相对含量的比较（1）

五.各组大鼠肺细小动脉COX-1、COX-2及COX-1mRNA、COX-2mRNA相对含量的比较（2）

分析与讨论

一.关于慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压模型

二.慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压血栓素和前列环素的变化

三.慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压COX的变化

四.西乐葆对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压的影响

五.红花注射液对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压的影响

结论

参考文献

附录

致谢

环氧化酶、血栓素/前列环素体系与肺动脉高压的关系

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