大鼠心肺复苏后心、脑及凝血系统损伤及银杏达莫注射液的干预作用

摘要

目的： 通过观察大鼠心肺复苏(CPR)后血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、脑红蛋白(NGB)浓度变化，血浆组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)浓度变化，海马CA1区和皮层HIF-1α、NGB表达，心肌和大脑组织病理改变，并用银杏达莫注射液进行干预，研究大鼠CPR后心、脑及凝血系统的损伤机制及银杏达莫注射液的保护作用。 方法： 成年雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠160只，随机分为对照组、复苏组、小剂量(0.8ml/kg)银杏达莫组(小剂量组)和大剂量(1.6ml/kg)银杏达莫组(大剂量组)，每组再分别按气管切开后(对照组)或自主循环恢复(ROSC)后(其余各组)0.5h、3h、6h、9h和24h分为5个亚组，每亚组8只。建立大鼠窒息型心脏骤停(CA)与CPR模型。各亚组分别于时间点取样。应用免疫抑制法测定血清CK-MB含量；Access免疫化学发光分析仪以及其配套试剂定量测定血清cTnI含量；双抗体夹心酶联免疫吸收分析法(ELISA)测定血清HIF-1α、NGB水平，血浆TF、TFPI水平；免疫组化方法测定海马CA1区和皮层HIF-1α、NGB表达；光镜和电镜下观察心肌和大脑组织的病理改变。 结果： 1.复苏组和大、小剂量组大鼠血清CK-MB含量从ROSC后0.5h开始即明显增高，并持续升高至9h达高峰，ROSC后24h有所回落，与对照组比较，各时间点血清CK-MB含量均显著增高(P＜0.01)；与复苏组比较，大、小剂量组从ROSC后3h起血清CK-MB含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01)；与小剂量组比较，大剂量组血清CK-MB含量在ROSC后0.5h、3h显著降低(P＜0.01)。 2.复苏组和大、小剂量组大鼠血清cTnI含量从ROSC后0.5h开始即明显升高，并一直持续升高至24h，与对照组比较，各时间点血清cTnI含量均显著增高(P＜0.01)；与复苏组比较，大、小剂量组血清cTnI含量在ROSC后各时间点均显著降低(P＜0.01)；与小剂量组相比，大剂量组血清cTnI含量在ROSC后6h、9h、24h均明显降低(P＜0.05)。 3.对照组血清HIF-1α含量复苏后一直维持在较低水平；与对照组比较，复苏组和大、小剂量组从ROSC后3h起开始显著升高，并持续升高至24h，各时间点复苏组均有非常显著性差异(P＜0.01)；与复苏组比较，大、小剂量组血清HIF-1α含量从ROSC后3h开始血清HIF-1α含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01)；与小剂量组比较，大剂量组血清HIF-1α含量在ROSC后3h、6h、9h、24h有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。 4.对照组血清NGB含量复苏后一直维持在较低水平；与对照组同时间点比较，复苏组和大、小剂量组大鼠ROSC后3h开始血清NGB含量即明显升高(P＜0.01)，并一直持续升高至24h；与复苏组同时间点比较，小剂量组在ROSC后3h、6h、9h血清NGB含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，大剂量组ROSC后3h、6h、9h和24h血清NGB含量显著降低(P＜0.01)；与小剂量组同时间点比较，大剂量组在ROSC后血清NGB含量在6h、9h和24h有显著性差异(P＜0.01)。 5.对照组大鼠血浆TF含量处于较低水平。与对照组比较，复苏组和大、小剂量组TF含量从ROSC后0.5h起显著升高(P＜0.01)，其数值在9h达到高峰，24h时有所下降；与复苏组比较，小剂量组大鼠血浆TF含量在6h、9h、24h均明显降低(P＜0.01)；与小剂量组比较，大剂量组大鼠血浆TF含量在6h、9h、24h均明显降低(P＜0.01)。 与对照组比较，复苏组大鼠血浆TFPT含量无显著差别(P＞0.05)，大、小剂量组大鼠血浆TFFI含量在24h点有所升高(P＜0.05)。 与对照组比较，复苏组和小剂量组血浆TFPI/TF比值显著下降(P＜0.01)，大剂量组血浆TFPI/TF比值在0.5h、3h下降，在6h、9h、24有所升高(P＜0.01)；与复苏组比较，大、小剂量组大鼠血浆TFPI/TF比值在6h、9h、24h明显升高(P＜0.01)；与小剂量组比较，大剂量组大鼠血浆TFPI/TF比值在6h、9h、24h有所升高(P＜0.05)。 6.CPR后24h海马CA1区、皮层HIF-1α和NGB表达就增加，棕褐色的HIF-1α和NGB阳性细胞颗粒，分布密集且胞浆着色较深。大、小剂量组海马CA1区和皮层HIF-1α和NGB表达较复苏组减少。 7.光镜和电镜下病理改变： 对照组心肌组织结构基本正常，肌纤维无肿胀，心肌细胞排列规整；复苏组CPR后见心肌细胞空泡变性，细胞溶解，肌纤维横纹消失及心肌纤维排列紊乱，呈波浪状改变，并可见大片心肌纤维溶解坏死大、小剂量组24h光镜和电镜下显示肌纤维排列尚规则和轻度水肿，未见明显坏死。 对照组锥体神经细胞和胶质细胞均无明显改变，形态正常，大小一致，核染色质均匀，核仁清楚，无明显核周空晕，细胞外组织间隙正常，毛细血管无扩张、充血，海马CA1区锥体细胞结构层次清晰，排列整齐，可见细胞核大而圆、淡染，核仁明显；复苏组CPR后24h锥体细胞坏死，数量明显减少，胶质细胞周围间隙扩大，空泡样改变，毛细血管扩张、充血，海马锥体细胞胞体皱缩，突起减少，细胞周围间隙明显增大，呈空泡状；大、小剂量组CPR后24h光镜和电镜下显示锥体细胞肿胀，核周间隙稍扩大，未见明显坏死空泡区，胶质细胞轻度水肿，细胞外组织间隙基本正常海马CA1区锥体细胞层结构基本正常，细胞形态较规则，胞膜、胞核及核仁清晰。 结论： 1.大鼠心肺复苏早期存在明显的心肌损伤，银杏达莫注射液能有效减轻复苏后心肌损伤，且该作用可能具有剂量-效应关系。 2.大鼠心肺复苏早期存在明显的脑损伤，银杏达莫注射液能明显减轻复苏后脑损伤，且该作用可能具有剂量-效应关系。 3.大鼠心肺复苏早期存在明显的促凝抗凝系统失衡，银杏达莫注射液能有效恢复复苏后促凝抗凝平衡，且该作用可能具有一定的剂量-效应关系。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

声明

前言

材料与方法

结果

附图一

附图二

分析与讨论

参考文献

四、附录

五、致谢

六、综述 心肺复苏中脑损伤保护药物的研究进展