HLA-DR抗原在干眼患者结膜上皮细胞中的表达研究

摘要

目的： 通过结膜印迹细胞学获取结膜上皮细胞，应用流式细胞术检测炎症激活标志物HLA-DR抗原及共刺激分子CD80/CD86在不同程度干眼患者球结膜上皮细胞中的表达。 方法； 通过OSDI干眼调查问卷、Schirmer试验、泪膜破裂时间测定、虎红染色筛选出2006年07月2007年9月在我院门诊就诊干眼患者52例(104眼)，并依据OSDI评分将干跟患者分为轻度组(22例44眼)、中重度(30例60眼)组，其中中重度组包含SS和Non-SS，并选择16例(32眼)，眼表正常人作为阴性对照。应用结膜印迹细胞学获取不同程度干眼患者和正常对照组球结膜上皮细胞，对其中76眼进行PAS组织学染色(其中正常对照组26眼、轻度干眼组30眼、中重度干眼组20眼)。通过流式细胞计数来定量分析炎症激活标志物HLA-DR抗原和共刺激分子B7：CD80/CD86的表达。 结果： 1.轻度组、中重度组及正常对照组OSDI评分分别为20.99±2.12、33.13±4.92、10.26±2.35，不同程度干眼组及正常对照组OSDI评分差异有明显统计学意义(P＜0.001)。轻度组、中重度组及正常对照组Schirmer试验分别为6.18±1.15mm、3.87±0.89mm、12.47±1.68mm，不同程度干眼组及正常对照组Schirmer试验结果差异有明显统计学意义(P＜0.001)。轻度组、中重度组及正常对照组泪膜破裂时间分别为6.61±1.06s、2.78±1.15s、11.84±1.08s，不同程度干眼组及正常对照组泪膜破裂时间差异有明显统计学意义(P＜0.001)。轻度组、中重度组及正常对照组虎红染色评分分别为1.70±0.95、6.25±1.20、0.69±0.69，不同程度干眼组及正常对照组虎红染色评分差异有明显统计学意义(P＜0。001)。中重度干眼组的结膜鳞状上皮化生程度明显高于轻度干眼组(Z=-3.860，P＜0.001)及对照组(Z=-5.034，P＜0.001)，轻度干眼组结膜鳞状上皮化生程度明显高于对照组(Z=-3.433，P=0.001)。 2.HLA-DR在轻度组、中重度组及正常对照组结膜上皮细胞中的表达率平均分别为31.77±9.11％、55.11±9.58％、6.83±3.66％，不同程度干眼组及正常对照组HLA-DR的表达量差异均具有明显统计学意义(P＜0.001)。在中重度干眼组中，SS组和Non-SS组HLA-DR的表达率平均分别为58.25±10.40％、51.97±7.72％，两组表达差异具有统计学意义(P＜0.05)。HLA-DR在结膜上皮细胞中的表达率与OSDI评分存在正相关关系(r=0.844，P＜0.001)，与虎红染色评分存在正相关关系(r=0.796，P＜0.001)，与Schirmer试验存在负相关关系(r=-0.824，P＜0.001)，与BUT存在负相关关系(r=-0.893，P＜0.001)，与鳞状上皮化生程度存在正相关关系(r=0.613，P＜0.001)。 3.中重度干眼组及正常对照组结膜上皮细胞中共刺激分子CD80的表达率平均分别为1.41±0.76％、1.17±0.67％，两组表达差异无统计学意义(P＞0.05)。中重度干眼组及正常对照组结膜上皮细胞中共刺激分子CD86的表达分别为2.45±1.09％、2.11±0.95％，两组表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论： 印迹细胞学取材联合PAS染色或流式细胞术分析是研究眼表疾病发病机制的有效方法。 HLA-DR在不同程度干眼患者结膜上皮细胞中的表达率与OSDI评分、虎红染色评分及结膜上皮鳞状化生程度存在正相关关系，与Schirmer试验及TBUT存在负相关关系。HLA-DR在不同程度干眼患者结膜上皮细胞中的表达情况反映了疾病的进展。 轻度干眼患者结膜上皮细胞出现HLA-DR的高表达，表明眼表局部免疫性炎症是引起干眼眼表损害的一个主要原因，而系统性免疫加重了眼局部免疫性炎症。 共刺激分子CD80/CD86在干眼患者结膜上皮细胞中的表达未见明显增高。

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论文说明:英文缩写及英中文对照

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前言

对象与方法

结果

分析与讨论

结 论

参考文献

附 录

致 谢

综述 印迹细胞学在眼表疾病诊治中的应用及其技术进展