X线反复照射人食管鳞癌细胞系KYSE-150的生物效应研究

摘要

目的:建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系，并检测肿瘤干细胞标志物的表达，以期了解肿瘤干细胞与放射抗拒性形成之间t的关系。
　　 方法:分次照射建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系KYSE-150R，在相差显微镜下观察细胞形态学差异，用G显带法进行染色体分析。用成克隆实验验证KYSE-150和KYSE-150R细胞的放射敏感性差异，流式细胞术检测它们的细胞周期分布，Western Blotting法检测它们中肿瘤干细胞(CSC)标志物β-catenin和Integrin-β1的表达。
　　 结果:KYSE-150R细胞的群体倍增时间长于亲代细胞KYSE-150[(25．90±0．55)h：(23．62±0．23)h，t=6．62，P=0．00]。KYSE-150R细胞的染色体数目增加，并观察到染色体畸变。KYSE-150R细胞SF2、D0、Dq及N值均高于KYSE-150细胞，D0值比为1．21。流式细胞仪分析显示KYSE-150细胞照射后S期比例增加(45．35％±4．03％：55．09％±1．70％，t=-3．86，P=0．02)，G2+M期比例下降(9．91％±3．83％:1．15％±0．32％，t=3．95，P=0．02)，而KYSE-150R则变化不大。Western Blotting结果显示KYSE-150R中的β-catenin和Integrin-β1的表达量约为KYSE-150细胞的2倍。
　　 结论:新细胞系KYSE-150R比其亲本更具放射抗拒性，其含有的CSC比例也较其亲本高，证明CSC与放射抗拒性产生机制有关。