吲哚美辛抵制黑色素瘤细胞系OCM-1裸鼠移植瘤生长的研究

摘要

目的：探讨吲哚美辛(IN)对人脉络膜黑色素瘤(CM)细胞系OCM-1细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其可能机制，为吲哚美辛在眼科领域的抗肿瘤应用提供理论依据。
　　 方法：将OCM-1细胞植入24只雌性裸鼠腋周皮下建立移植肿瘤模型，建模后5～6d，待肿瘤长至5mm大小时，将荷瘤鼠随机分为空白对照组、生理盐水组、IN1mg/kg组、IN2mg/kg组，按组每日腹腔注射相应的药物，连续用药2周，观察肿瘤生长情况。2周后处死动物，称量肿瘤重量并计算抑瘤率；应用HE染色检测各组肿瘤组织组织病理情况；免疫组织化学法检测各组裸鼠肿瘤组织中增殖细胞相关核抗原(ki67)、凋亡抑制因子(survivin)蛋白的表达；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析各组裸鼠肿瘤组织中survivin、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。
　　 结果：
　　 1．治疗后，空白对照组、生理盐水组、IN1mg/kg组、IN2mg/kg组的肿瘤体积分别为：（1547.91±360.08）mm3、（1524.20±354.75)mm3、(1122.04±183.76)mm3、(783.01±92.25)mm3，肿瘤重量分别为：(1.48±0.26)g、（1.46±0.17)g、（1.13±0.22)g、(0.76±0.18)g,IN1mg/kg组、IN2mg/kg组较空白对照组、生理盐水组CM肿瘤体积缩小、重量减轻，与空白对照组、生理盐水组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；IN2mg/kg组CM肿瘤的体积和重量均小于IN1mg/kg组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。IN1mg/kg组、IN2mg/kg组的抑瘤率分别为22.86％、48.00％，抑瘤率随IN剂量的增加而升高。
　　 2．HE染色组织病理检测：空白对照组及生理盐水组肿瘤组织血管丰富，局部可见大片坏死区，细胞排列较紊乱，异型性明显，病理性核分裂像常见，两组之间无显著差异。IN1mg/kg组肿瘤组织中血管减少，坏死区面积减少，异型性没有空白对照组和生理盐水组显著。IN2mg/kg组肿瘤组织血管及坏死区面积显著减少，细胞排列较规律，病理性核分裂像较其他三组减少，可见肿瘤细胞凋亡改变。
　　 3．免疫组织化学染色及RT-PCR检测：空白对照组、生理盐水组、IN1mg/kg组、IN2mg/kg组ki67增生指数分别为（76.73±3.34）％、（73.30±2.95）％、(55.97±2.24)％、（32.87±2.91）％，IN2mg/kg组ki67增生指数在肿瘤组织中的表达较空白对照组、生理盐水组明显下降，差异均有统计学意义(P＜0.05)；但IN1mg/kg组与其他3组间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。IN2mg/kg组survivin蛋白及mRNA、VEGFmRNA在肿瘤组织中的表达较空白对照组、生理盐水组明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）；但IN1mg/kg组与其他3组间上述3项的差异均无统计学意义（P＞0.05）。
　　 结论：
　　 1．IN可抑制OCM-1裸鼠移植瘤的生长，其对OCM-1裸鼠移植瘤的抑制呈剂量依赖性。
　　 2.IN通过下调survivin的表达，诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖，从而抑制OCM-1裸鼠移植瘤的生长。
　　 3．IN通过下调VEGF的表达，抑制肿瘤血管生成，从而抑制OCM-1裸鼠移植瘤的生长。
　　 4．Survivin和VEGF可能在抑制CM的生长方面存在协同作用。IN可能通过诱导肿瘤细胞凋亡协同阻断肿瘤血管生成途径，共同抑制肿瘤细胞增殖，进而抑制CM移植瘤生长。