营养状况、体成分、Leptin及其受体基因多态性对舞蹈专业青春期女性骨骼健康状况的影响

摘要

目的： 1．以青春期舞蹈专业女性为研究对象，了解其膳食模式和营养状况、体力活动水平、月经状况对骨健康是否存在影响，了解舞蹈专业青春期女性中“三联综合症”流行情况，初步探讨各影响因素的相关关系； 2．探讨激素水平包括雌激素和瘦素(Leptin)水平与青春期女性骨健康状况的关系； 3．探讨瘦素受体(LEPR)及雌激素受体基因多态性与青春期女性骨健康状况的关系； 方法： 1．研究对象的选取：在北京舞蹈学院及北京劲松职业高中各选取100名15-16岁青春期女孩，筛选出未长期服用过影响骨代谢药品、无骨质疏松家族史及任何骨代谢疾病的志愿者作为研究对象。 2．问卷调查 2．1 膳食营养状况：用七天24小时膳食回顾法调查受试对象平均每日的膳食总能量和主要营养素的摄入量，调查受试对象是否有不良的膳食习惯，包括饮食不规律、使用减肥药、催吐剂等药品的情况； 2．2 体力活动状况：调查问卷参照2002年全国营养调查所用的相关表格并进行适当的修改，包括每天体力活动的类型、强度及持续的时间等； 2．3月经状况和骨骼损伤情况：采用医学体检表进行登记，包括初潮年龄、月经紊乱的情况、停经或闭经时间及是否有骨骼损伤情况等。 3．检测指标和方法： 3．1体质指数：BMI=体重(kg)/身高(m<'2>)； 3．2骨转化生化指标：抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)使用进口酶联免疫试剂盒测定； 3．3激素水平测定：血清雌激素和瘦素(Leptin)蛋白使用酶联免疫试剂盒测定； 3．4全身和前臂骨密度：采用双能x射线吸收仪测定； 3．5体成分：采用双能x射线吸收仪测定； 3．6 ER-a和Leptin受体基因型分析：采用PCR-RFLP方法，采调查人群全血，用全血DNA提取试剂盒提取总DNA，分别设计针对ER-a和Leptin受体的特异引物进行PCR扩增，并用相应限制性内切酶(PvuⅡ、Xba Ⅰ和MspⅠ)酶切后电泳，在紫外灯下观察片断分布，确定每人的等位基因类型。 结果： 一、基本情况： 本次实验实验组最终收集到舞蹈学院女生的60人，对照组(普通中学女生)77人，其中北京舞蹈学院组女生，平均年龄为16.47±0.67岁，开始职业性舞蹈训练的平均年龄为11.26±1.56岁，接受职业性舞蹈训练的平均时间为3.64±0.92年，平均每周舞蹈训练时间为38.86±10.15小时；据医学体检结果分析，平均体重为48.89±4.78kg，平均身高为163.53±4.25cm，平均BMI为18.26±1.42，其中BMI小于正常体质指数下限(18.5)的人数有30人(占50％)，平均体脂含量为24％；对照组为北京市劲松职业高中高一女生，平均年龄16.39±0.63岁，平均体重为54.95±8.84kg，平均身高为159.05±5.94cm，平均BMI为21.70±3.13，平均体脂含量为34％。 二、研究对象膳食营养素摄入、月经及骨骼健康状况及其与骨健康状况相关关系。 1．研究对象膳食营养素摄入、月经及骨骼健康状况舞蹈学院组平均日摄入能量和脂肪摄入量分别为1792.55±430.22 kcal和63.66±15.71g，均显著低于对照组能量和脂肪摄入量(P<0.05)，其中14人的日摄入量小于1500kcal(占25％)；舞蹈学院女生钙摄入量和蛋白质摄入量分别为613.57±269.49 mg和73.18±27.28g，显著高于对照组(P<0.05)；舞蹈学院女生铁摄入量为22.66±13.10mg，与对照组无显著性差异；从月经情况的调查来看，舞蹈学院组平均初潮年龄低于同龄人，为13.71±0.92岁(对照组初潮年龄为13.98±0.92岁)，在参加调查的60人中，有11(18.3％)人没有月经初潮；有34人月经不规律(占69.4％)，13人曾经有过连续停经史(28.3％)，有痛经史的人数为18人(36.8％)；第二性征(包括阴毛和乳房发育)舞蹈学院组评分指标显著低于对照组；实验组左臂、右臂及左前臂BMD显著低于对照组，全身BMD两组间无显著性差异。 2．膳食紊乱、月经不规律与骨质疏松的关系。 (1)摄入的能量与消耗的能量之差为可利用能量，它们的关系用能量平衡表示，舞蹈学院组女生膳食控制严格，膳食摄入总能量稍低于运动消耗量，未发现可利用能量与全身骨密度有显著相关性； (2)月经周期次数与骨密度评分有较为密切的关系，其中月经不规律表现得较严重的女生，包括一年月经次数在0-3次或13次以上的骨密度评分(Zscore)较低，分别为-0.11和-0.18，低于一年月经次数在4-11次的女生(Zscore为0.16)； 3．影响雌激素水平因素分析。雌激素是骨骼保留骨质、防止骨质过量流失的关键激素，本研究用逐步多元回归法探讨体内雌激素水平与运动及膳食的关系，研究自变量为身高、体重、膳食能量摄入、蛋白质、脂肪、碳水化合物摄入量，专业性舞蹈训练量和可利用能量。结果显示舞蹈训练运动量和膳食脂肪摄入量是影响雌激素水平的重要因素，回归模型中专业性舞蹈运动量和膳食脂肪摄入量的回归系数分别是0.30和0.42(P<0.05)。 三、Leptin与BMD关系的研究。 1．观察到体内的Leptin水平与体脂含量间存在显著的正相关，舞蹈学院女生的体脂含量显著低于正常对照，舞蹈学院女生的Leptin水平也显著低于正常对照组(0.24 vs.0.34ng/ml，P<0.05)； 2．在舞蹈专业青春期女生中，Leptin与全身BMD和左腿BMD有显著正相关关系，在正常的对照组人群中，Leptin与全身BMD、左右腿BMD、左右臂BMD和左前臂远端BMD有显著的正相关关系； 3．Leptin对骨代谢的作用受到瘦素受体(LEPR)基因Gln223Arg多态的影响，本次实验分析了不同LEPR基因型中，Leptin与各部位BMD的相关关系，结果发现，在GG基因型中，Leptin与全身BMD的相关系数显著高于GA和AA型(0.461 vs.0.343)，这种差异同样也存在于Leptin与左右腿BMD的相关系数中。 四、LEPR和ER-a基因多态性与骨健康关系的研究。 1．LEPR和ER-a基因多态性的人群分布： 对60名女孩进行基因型分析，结果显示LEPR的MspI的酶切多态性在青春期舞蹈专业女生中的分布是：AA1.7％，GG71.7％，GA26.7％；ER-a基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切片断多态性在舞蹈学院青春女孩中的分布：PP 20.8％，pp 43.4％，Pp 35.8％；XX 15.1％，xx 60.4％，Xx24.5％；联合分析两种酶切片断多态性，分布为PPXX 11.3％，ppXX 3.8％，PpXX 0％，PPxx 3.8％，ppxx 34.0％，Pp xx20.8％，PP Xx 5.7％，PP Xx 3.8％，Pp Xx 15.1％；三种基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)，说明此人群具有代表性。各基因型在对照组中的分布为：对77名女孩进行基因型分析，结果显示LEPR的MspI的酶切多态性的分布是：AA 1.3％，GG79.2％，GA19.5％；ER-a基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切片断多态性的分布：PP 10.4％，pp 57.1％，Pp 32.5％，XX 7.8％，xx 58.4％，Xx33.8％；三种基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)，说明此人群具有代表性。 2．LEPR和ER-a基因多态性与骨健康状况的关系。 (1)在LEPR基因型为GG型的人群中，在控制了BMI，膳食摄入量和户外活动时间等影响因素后协方差分析得到左前臂远端BMD和左前臂近端BMD显著高于AA/GA型(P<0.05)；两基因型在其他部位骨密度没有显著性差异； (2)在控制了BMI，膳食摄入量和户外活动时间等影响因素后，协方差分析ER-a基因PvuⅡ和XbaⅠ各基因型的BMD差异，Pp型的全身骨密度显著高于pp型和PP型；XbaⅠ各基因型间BMD没有显著性差异； (3)ER-a和LEPR的联合作用分析，ER-a的PvuⅡ基因多态性与LEPR联合作用分析结果为：Pp+GG型个体左前臂近端BMD和左前臂桡骨近端BMD显著高于Pp+GA/AA型；ER-a的XbaⅡ基因多态性与LEPR联合作用分析，XX+GG型个体左腿BMD显著高于XX+GA/AA型。

目录

论文说明：英文缩略词及图表目录

声明

摘要

前言

对象与方法

结果

讨论

参考文献

论文综述：骨质疏松症的遗传学研究进展

致谢

个人简历