线粒体转录因子A对肿瘤细胞增殖与自噬的影响及其调控机制研究

目录

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摘要

第一章绪论

1．1肿瘤简介

1．2线粒体

1．2．1线粒体的起源

1．2．2线粒体结构简介

1．2．3线粒体功能简介

1．3线粒体对肿瘤发生的影响

1．3．1基因层面

1．3．2线粒体介导的信号层面

1．3．3线粒体代谢层面

1．4肿瘤的治疗

1．4．1放化疗以及免疫疗法

1．4．2靶向线粒体的肿瘤治疗

1．5线粒体转录因子A

1．5．1线粒体转录因子A的结构

1．5．2线粒体转录因子A的功能

1．5．3 TFAM对细胞功能状态的影响

1．6本论文研究的内容及意义

第二章材料与方法

2．1实验仪器与设备

2．2实验试剂

2．3试剂溶液配置

2．4实验方法

2．4．3细胞系的构建

2．4．4 RM干扰实验

2．4．5免疫印迹检测

2．4．6 RT-PCR实验

2．4．7免疫荧光检测

2．4．8克隆存活实验

2．4．9荧光素酶报告基因检测

2．4．10细胞增殖实验

2．4．11细胞周期检测

2．4．12蛋白免疫共沉淀实验

2．4．13线粒体ROS含量检测

2．4．15蛋白稳定性检测

2．4．16数据统计学分析

第三章TFAM对肿瘤细胞辐射敏感性的影响及其机制研究

3．1背景介绍

3．2实验结果

3．2．1 TFAM缺失抑制细胞增殖并导致细胞周期阻滞

3．2．2 TFAM缺失加剧电离辐射引起的DNA双链断裂损伤和细胞死亡

3．2．3 TFAM缺失引起线粒体超氧化物的积累并导致DNA损伤

3．2．4 TIGAR参与TFAM缺失细胞中线粒体超氧化物及DSB的积累

3．2．5 p53／TIGAR信号通路受阻导致TFAM低表达细胞中DNA损伤加重

3．3讨论

第四章TFAM对肿瘤细胞自噬的影响及其机制研究

4．1背景介绍

4．2实验结果

4．2．1 TFAM的缺失抑制自噬小体的形成

4．2．2下调PISD阻碍了TFAM缺失细胞中LC3-Ⅱ的形成

4．2．3饥饿条件下可诱导PISD的上调

4．2．4 p53参与调控PISD的表达

4．2．5抑制p53和PISD会阻碍LC3-Ⅱ形成

4．2．6 p53蛋白C末端的乙酰化修饰影响对PISD的调控

4．2．7 SIRT1的上调抑制TFAM缺失细胞中p53乙酰化

4．3讨论

5．1工作总结

5．2工作展望

参考文献

致谢

在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果