小细胞肺癌中BET蛋白影响Keap1/Nrf2/G6PD轴参与调控戊糖磷酸途径的研究

目录

声明

摘要

引言

第1章绪论

1．1细胞代谢与氧化还原

1．2活性氧

1．2．1活性氧的类型

1．2．2活性氧的危害

1．2．3细胞内抗氧化剂

1．3细胞内抗氧化系统

1．3．1硫氧还蛋白系统

1．3．2谷胱甘肽系统

1．3．3 Nrf2参与抗氧化系统

1．4核因子E2相关因子(Nrf2)

1．4．1 Nrf2的结构

1．4．2 Keap1-Nrf2途径

1．4．3 Nrf2在癌症中的双重作用

1．4．4 Nrf2在癌症化疗抗性和放疗抗性中的作用

1．4．5 Nrf2活性调控的分子机制

1．4．6 Nrf2与肺癌

1．4．7 Nrf2与戊糖磷酸途径

1．5 BET蛋白家族

1．5．1 BET蛋白家族

1．5．2 BET蛋白与表观遗传调控

1．5．3 BET蛋白与Nrf2

1．6本课题研究的目的和内容

第2章实验材料和方法

2．1实验材料

2．1．1主要实验材料、试剂及试剂盒

2．1．2主要实验仪器设备及器材

2．1．3主要抗体及小分子抑制剂

2．2细胞培养

2．3细胞传代

2．4细胞冻存

2．5细胞复苏

2．6蛋白质免疫印迹分析(Western Blot)

2．6．1蛋白提取

2．6．2蛋白浓度检测

2．6．3电泳

2．6．4转膜

2．5．5封闭孵育与显色

2．7实时定量qPCR

2．7．1 RNA提取

2．7．2逆转录

2．7．3实时定量PCR

2．8细胞活性检测

2．9药物协同评估

2．10 NMR检测细胞代谢物

2．11 NADP／NADPH检测

2．12细胞核细胞浆蛋白质分离

2．13数据分析

第3章实验结果

3．2 BRD4抑制剂JQl对Keap1-Nrf2轴的影响

3．2．1 JQ1抑制Keap1表达水平

3．2．2 JQ1处理引起小细胞肺癌中的Nrf2定位变化

3．3 ATRA协同增加JQ1对SCLC细胞的杀伤，机制与ROS相关

3．4 JQ1增强小细胞肺癌戊糖磷酸途径及生物合成

3．4．1小细胞肺癌中G6PD与BRD4的相关性关系

3．4．3 JQ1处理促进PPP途径激活

3．5 RRx-001协同增加JQ1对SCLC细胞的细胞毒性

第4章总结与讨论

4．1总结

4．2讨论

附录

参考文献

致谢

在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果