声明
摘要
第1章绪论
1．1．1癌症的现状
1．1．2癌症的生物学特性
1．1．3癌症的诊断与治疗
1．2乳腺癌概述
1．2．1乳腺癌的诱因和预防
1．2．2乳腺癌的分期和分类
1．2．3乳腺癌的诊断和治疗
1．3细胞凋亡与肿瘤转移
1．3．1原位肿瘤的转移过程
1．3．2细胞凋亡及失巢凋亡
1．4细胞内质网与钙离子稳态
1．4．1钙离子与内质网应激
1．4．2内质网钙离子泵SERCA2
1．4．3内质网分子伴侣BAP31
第2章实验结果与讨论
2．1．1 BAP31在乳腺癌中高表达
2．1．2 BAP31在乳腺癌中与不良预后相关
2．1．3 BAP31在乳腺癌细胞系中高表达
2．2．1 BAP31与SERCA2分子直接结合
2．2．2 BAP31影响SERCA2转运钙离子功能
2．2．3 BAP31与SERCA2分子协同维持细胞ER稳态
2．3．1 BAP31影响乳腺癌细胞增殖
2．3．2 BAP31影响乳腺癌细胞克隆形成、非锚定生长能力
2．3．3 BAP31影响乳腺癌细胞转移侵袭
2．3．4 BAP31影响乳腺癌细胞凋亡和失巢凋亡
2．4 SERCA2在乳腺癌细胞恶性表型中的作用
2．4．1 SERCA2影响乳腺癌细胞增殖
2．4．2 SERCA2影响乳腺癌细胞克隆形成、非锚定生长能力
2．4．3 SERCA2影响乳腺癌细胞转移侵袭
2．4．4 SERCA2影响乳腺癌细胞凋亡和失巢凋亡
2．5 BAP31通过SERCA2促进乳腺癌细胞增殖转移
2．6 BAP31在体内维持乳腺癌生长和转移
2．6．1 BAP31影响乳腺癌原位肿瘤生长
2．6．2 BAP31影响乳腺癌原位组织浸润和远端转移能力
2．7结果与讨论
第3章材料与方法
3．3质粒载体的构建
3．3．1 BAP31和SERCA2过表达载体的构建
3．3．2 BAP31和SERCA2敲低载体的构建
3．5细胞和组织总RNA的抽提和检测
3．5．2细胞的总RNA抽提
3．5．3 cD№的合成和实时荧光定量PCR
3．6细胞总蛋白的提取和检测
3．7细胞功能检测实验
3．7．3细胞凋亡和失巢凋亡的检测
3．7．4细胞软琼脂非锚定生长能力检测
3．7．5细胞基质胶培养实验
3．7．6细胞迁移和侵袭能力检测
3．7．7细胞划痕愈合能力检测
3．7．8细胞分散实验
3．8蛋白质免疫沉淀实验
3．9银染实验
3．10免疫荧光实验
3．11细胞内质网钙离子外流的检测
3．12肿瘤切片的免疫组织化学染色
3．13小鼠原位脂肪垫荷瘤实验
3．14尾静脉小鼠肿瘤肺转移实验
3．15生物信息学分析及统计
参考文献
附录
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
中国科学技术大学;
