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致谢
摘要
英文缩写词
第一章绪论
1.1食品安全
1.2双酚A的理化性质
1.3双酚A:一种内分泌干扰物
1.4双酚A在环境中的分布
1.5双酚A与食品安全
1.6国内以及国际上双酚A的限量标准及相关法律法规
1.7双酚A对人体的危害
1.7.1双酚A对生殖系统的损害
1.7.2双酚A和表观遗传学
1.7.3双酚A和癌症
1.8双酚A暴露对神经系统的影响
1.9神经系统中的双酚A和雌激素
1.10双酚A影响突触传递的可能机制研究
1.11双酚A对神经环路的影响的研究
1.12神经环路研究的方法和手段
1.12.1传统的神经环路研究方法
1.12.2以嗜神经病毒为工具的神经环路研究方法
1.13课题研究的背景和意义
1.14课题研究的主要内容
1.15技术路线图
1.16主要创新点
第二章双酚A暴露对离体培养海马神经元突触传递的影响
2.1实验材料
2.1.1主要仪器
2.1.2主要试剂和药品
2.2实验方法
2.2.1离体原代海马锥体神经元培养
2.2.2全细胞电生理记录系统
2.2.3免疫细胞化学
2.3数据分析
2.4实验结果
2.4.1双酚A暴露对离体培养原代海马锥体神经元兴奋性突触传递的影响
2.4.2双酚A暴露对离体培养原代海马锥体神经元抑制性突触传递的影响
2.4.3双酚A暴露对离体培养原代海马锥体神经元兴奋性突触传递相关蛋白的影响
2.4.4双酚A暴露对离体培养原代海马锥体神经元抑制性性突触传递相关蛋白的影响
2.5本章小结与讨论
第三章双酚A影响突触传递是雌激素经典信号通路ERα/β依赖的
3.1.1主要仪器
3.1.2主要试剂和药品
3.1.3质粒构建引物
3.2实验方法
3.2.1离体原代海马锥体神经元培养
3.2.2全细胞电生理记录系统
3.2.3菌种培养方法
3.2.4脑组织全基因组DNA提取
3.2.5半定量聚合酶链式反应(PCR)
3.2.6质粒提取方法
3.2.7质粒DNA转化
3.2.8 DNA切胶回收方法
3.2.9 GAD65-ERE Dual-Luciferase质粒的构建
3.2.10 Lipofectamine 3000脂质体质粒转染
3.2.11荧光素酶报告基因系统实验
3.3数据分析
3.4.1双酚A能促进GAD65雌激素反应元件的表达
3.4.2双酚A和雌二醇E2对抑制性突触传递的影响
3.4.3雌二醇E2和双酚A对抑制性突触传递的影响是雌激素经典通路ERα/β依赖的
3.5本章小结与讨论
第四章发育期双酚A暴露对SD大鼠行为的影响及其可能机制研究
4.1实验材料
4.1.1主要仪器
4.1.2主要试剂和药品
4.2实验动物
4.3实验方法
4.3.1 Morris水迷宫
4.3.2蛋白质免疫印迹法(Western Blot)
4.3.3 Golgi-cox染色
4.4数据分析
4.5实验结果
4.5.1发育期双酚A暴露后,SD大鼠的学习能力发生了明显的降低
4.5.2发育期双酚A暴露后,SD大鼠的记忆能力受到了明显的损害
4.5.3发育期双酚A暴露对海马CA1区和DG区神经元树突分支的影响
4.5.4发育期双酚A暴露改变了SD大鼠海马CA1区和DG区神经元树突棘密度和形态
4.5.5发育期双酚A暴露SD大鼠海马CA1区和DG区神经元Arc表达的影响
4.6本章小结与讨论
第五章发育期双酚A暴露影响学习记忆的神经环路及其潜在机制研究
5.1实验材料
5.1.3实验动物
5.1.4实验病毒
5.2实验方法
5.2.1 Thy1-Cre转基因小鼠的基因型鉴定
5.2.2半定量聚合酶链式反应(PCR)
5.2.3 Morris水迷宫
5.2.4巴恩斯(Barnes)迷宫
5.2.5 PFA灌流和冰冻切片
5.2.6免疫组织化学
5.2.7脑定位立体注射病毒技术
5.3数据分析
5.4实验结果
5.4.1双酚A发育期暴露降低了Thy1-Cre小鼠的学习记忆能力
5.4.2 Thy1-Cre小鼠海马CA1区逆向单级示踪注射位点
5.4.3发育期双酚A暴露导致海马内部CA3-CA1和内嗅皮层EC-CA1投射的减少
5.4.4发育期双酚A暴露导致的海马内部投射的较少主要表现在CA3-CA1的兴奋性投射上
5.4.5发育期双酚A暴露导致的内嗅皮层EC-CA1的投射的减少表现在EC-CA1的兴奋性投射上
5.5本章小结与讨论
参考文献
攻读博士学位期间的学术活动及成果情况
合肥工业大学;