miR-139-3p在胃癌组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的作用

摘要

研究背景:胃癌是一种常见的消化道肿瘤，尽管近年来胃癌的发病率有所下降，但在我国胃癌仍是发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一。因此寻找到特异性的诊断标记物和高效的靶向药物，对于改善患者预后和提高患者生存率有深远的意义。近年来研究发现的微小RNA(miR)作为一种非编码的内源性RNA，是由18～23个核苷酸构成的单链非编码RNA分子，通过与靶基因mRNA的3'端非编码区（UTRs）结合，降解或抑制mRNA的翻译导致靶基因的转录后沉默，从而参与靶基因功能的调节。miRNA参与生命过程中一系列的重要进程，包括早期发育、细胞增殖、分化和凋亡等。进一步研究发现，miRNA的异常表达还与肿瘤的发生发展有着密切关系。因此，以miRNA作为研究切入点，为胃癌的早期诊断和药物靶向治疗开辟了一条新的路径。
　　 目的:研究miR-139-3p在配对胃癌组织和癌旁正常组织中的表达水平，探讨miR-139-3p在胃癌组织中的表达与胃癌患者临床病理特征的相关性，观察miR-139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株的增殖和凋亡的作用。
　　 方法:收集38例新鲜胃癌手术切除标本及癌旁正常组织，利用TRIZOL试剂提取总RNA，利用逆转录试剂盒合成cDNA，采用qRT-PCR法检测各个样本中miR-139-3p的表达情况，并分析miR-139-3p的表达与胃癌临床病理特性之间的关系。取对数生长期AGS和SGC-7901细胞接种于6孔板中（细胞浓度2×105个/孔）。按转染试剂盒要求，将miR-139-3p抑制剂Anti-hsa-miR-139-3p miScriptmiRNA Inhibitor(miR-139-3p Inhibitor)作用于细胞，作为实验组;将miScriptInhibitor Negative Control作用于细胞，作为对照组。转染24h后，qRT-PCR检测miR-139-3p的表达水平，MTT法检测miR-139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株增殖的影响，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。
　　 结果:qRT-PCR结果显示:miR-139-3p在胃癌组织中表达高于癌旁正常组织，其表达升高与肿瘤大小(P＜0.05)和部位(P＜0.05)相关。胃癌AGS和SGC-7901细胞株转染miR-139-3p抑制剂24h后，实验组的相对表达量显著低于对照组。MTT结果显示:培养24h、48h、72h后，实验组AGS细胞相对增殖率分别为95.3％±2.18％、87.5％±2.04％、83.8％±3.59％（均P＜0.05）;实验组SGC-7019细胞相对增殖率分别为92.1％±4.22％、85.3％±1.76％、74.7％±3.39％(均P＜0.05)。流式细胞仪检测结果显示:实验组AGS细胞的早期凋亡细胞比例较对照组显著增加，差异具有统计学意义。而SGC-7901的早期凋亡细胞比例增加不是很明显。
　　 结论:miR-139-3p在胃癌组织中表达明显高于癌旁正常组织，并与胃癌的肿瘤直径、部位相关。下调miR-139-3p的表达对胃癌细胞株AGS和SGC-7901具有抑制增殖和促进凋亡的作用。

目录

摘要

前言

第一部分 miR-139-3p在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达情况

一、材料与方法

二、结果

第二部分 miR-139-3p抑制剂下调AGS和SGC-7901胃癌细胞株中miR-139-3p的表达

一、材料与方法

二、结果

第三部分 miR-139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株增殖和凋亡作用的研究

一、材料与方法

二、结果

分析与讨论

小结

参考文献

附录

致谢

MicroRNA与胃癌的研究进展

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