“Cocktail”法评价急、慢性硫化氢中毒对大鼠肝细胞色素P450酶亚型活性的影响

摘要

目的:
　　 本研究是为了观察急、慢性硫化氢中毒对大鼠肝细胞色素氧化酶(CYP450)亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2B6和CYP2D6的作用，为硫化氢肝脏毒性机制研究及硫化氢中毒后的临床合理用药提供参考。
　　 方法:
　　 选采用“cocktail”探针药物法，使用4种特异性探针药物:非那西丁、甲苯磺丁脉、安非他酮和美托洛尔，通过其药代动力学参数的变化来评价急、慢性硫化氢中毒对大鼠肝脏P450酶亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2B6和CYP2D6的诱导或抑制作用。实验大鼠分急性硫化氢中毒和慢性硫化氢中毒两种模型，每批实验大鼠分设对照组和模型组。急性中毒实验大鼠给予一定高浓度的硫化氢气体(0ppm或300ppm)，一次染毒，用时30min。慢性中毒实验大鼠给予一定低浓度的硫化氢气体（0ppm或20ppm），每日早、晚染毒，每次用时30min，为期40天。各组大鼠于舍下静脉同时注射4种探针药物的混合物，再于一系列时间点尾静脉取血，采用梯度洗脱液相色谱-串联质谱法检测(即LC-MS)法对血浆探针药物浓度进行测定，通过对实验组和对照组探针药物药代动力学参数的比较，间接反映急、慢性硫化氢中毒对上述CYP450酶亚型的影响。
　　 结果:
　　 1.在急性硫化氢染毒实验中，对照组和模型组的非那西丁t1/2分别为0.44±0.10和048±0.12h，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为2279.65±367.97和2531.39±502.66;甲苯磺丁脲t1/2分别为12.33±0.42和13.59±1.56，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为15321.04±2498.08和18191.84±3705.54;安非他酮t1/2分别为1.27±0.21和1.14±0.31， AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为4827.94±853.98和4827.14±1009.78;美托洛尔t1/2分别为1.35±0.24和1.51±0.32，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为3309.77±508.43和3700.60±635.64。经t-test检验，两组中甲苯磺丁脲和美托洛尔t1/2p＜0.05，其余2种药物的t1/2无显著性差异。
　　 2.在慢性硫化氢染毒实验中，对照组和模型组的非那西丁t1/2分别为1.02±0.12和0.63±0.16h，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为2867.64±526.28和1845.86±435.09;甲苯磺丁脲t1/2分别为11.13±0.96和18.13±3.10，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为18235.70±3407.32和29069.42±3711.31;安非他酮t1/2分别为1.419±0.45和0.943±0.39，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别6390.53±1598.00和5165.45±1509.34;美托洛尔t1/2分别为1.70±0.35和4.89±1.78，AUC(0-∞)(h.ng/mL)分别为2322.88±374.46和4752.21±1023.21。经t-test检验，四种药物的t1/2和AUC（0-∞）均为p＜0.01。
　　 结论:
　　 1、急性硫化氢中毒对大鼠肝细胞色素氧化酶P450亚型CYP2C9和CYP2D6有轻度的抑制作用，而对CYP1A2和CYP2B6无影响。
　　 2、慢性硫化氢中毒对大鼠肝细胞色素氧化酶P450亚型CYP1A2和CYP2B6有诱导作用，对CYP2C9和CYP2D6有抑制作用。

目录

缩略词表

摘要

第一章 前言

第二章 材料与方法

一．材料

二．方法

第三章 实验结果

(一)方法学确证

(二)探针药物血浆浓度测定结果

第三章 分析与讨论

1．探针药物的确定

2．色谱条件的建立

3．样品处理

4．实验动物的选择

5．硫化氢中毒模型的建立

6．探针药物的溶解方式

7．给药方式

8．实验结果分析

参考文献

附录 科研与论文发表

致谢

综述 硫化氢曝露对机体影响的研究进展

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