酰氯法合成依曲替酸酰胺衍生物及4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯诱导白血病细胞分化的药效学研究

摘要

目的：本研究以依曲替酸为母核，设计合成一系列依曲替酸酰胺衍生物，并以1HNMR，13CNMR和HR-MS 进行结构确认，并对具有药理学活性的4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯诱导白血病细胞分化的药效学进行研究。　　 方法：　　 1.以依曲替酸为母核，采用酰氯法，在极性端基部位引入含三氟甲基苯胺结构的化合物，合成一系列新型依曲替酸酰胺衍生物。　　 2.通过对本实验室已合成的依曲替酸衍生物进行体外抗肿瘤活性实验，结果表明4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯(ATPA)具有较好的药理学活性。4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯作用于K562和NB4细胞后，通过MTT 法检测细胞的增殖。　　 瑞氏染色法在倒置相差显微镜下观察加药处理前后细胞形态学变化。采用细胞计数方法观察白血病细胞在不同浓度的药物作用下生长曲线的改变，NBT 还原实验法分析细胞在不同浓度作用下的分化指标，FCM 检测分析细胞周期及K562细胞表面分化抗原CD71和NB4细胞表面分化抗原CD11b，CD13的变化。　　 结果：　　 1.通过1HNMR，13CNMR和HR-MS进行结构鉴定，确认了5种尚未见文献报道的依曲替酸酰胺类衍生物的结构。分别为N-(2-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(2-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺和N-(4-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺。具体结构见表1。2.4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（ATPA）是抑制增殖和诱导分化活性较强的衍生物，进行药效学研究发现，ATPA呈浓度依赖和时间性依赖抑制K562和NB4细胞增殖的作用。其诱导分化活性表现为油镜下观察白血病细胞向粒系分化成熟的改变，NBT阳性细胞率增加，NB4细胞表面分化抗原CD11b表达增加，CD13表达减少，作用与阳性对照依曲替酸相类似。并随作用时间延长而变化加大。ATPA(10-5mol/L)作用3d后G0/G1期细胞表达量增加，S期细胞表达量减少，呈G1期阻滞。　　 结论：合成了5种尚未见文献报道的依曲替酸酰胺类衍生物；4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（ATPA）有较强的抑制K562和NB4细胞增殖并诱导其分化的活性，但其诱导分化的机制有待于进一步研究。

目录