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Mitofusin穿膜区两侧的元件在其定位及膜融合功能中的作用研究

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第一章 引言

第一节 线粒体的形态结构与功能

1.1.1 线粒体的形态与结构

1.1.2 线粒体的动态

1.1.3 Mitofusin介导的线粒体外膜融合

1.1.4 OPA1介导的线粒体内膜融合

1.1.5 Ugo1在线粒体融合过程中的作用

1.1.6 线粒体的分裂

1.1.7 线粒体动态的生理意义

第二节 内质网的形态与融合机制

1.2.1 内质网的形态结构与功能

1.2.2 内质网塑形机制

1.2.3 Atlastin介导的内质网膜融合

第三节 其他生物膜融合

1.3.1 病毒介导的膜融合

1.3.2 SNARE介导的膜融合

1.3.3 细胞融合

第四节 Dynamin GTP酶超家族

1.4.1 Dynamin超家族的结构及分类

1.4.2 Dynamin超家族蛋白的功能

第五节 本论文研究意义

第二章 实验材料,原理及方法

2.1.1 实验试剂及仪器

2.1.2 主要实验仪器

2.1.3 主要溶液配制

第二节 实验方法

2.2.1 质粒构建

2.2.2 哺乳动物细胞的培养,转染与免疫荧光

2.2.3 酵母细胞的转化

2.2.4 酵母细胞的培养和目的蛋白的表达检测

2.2.5 酵母生长实验

2.2.6 酵母荧光观察定位实验

2.2.7 酵母膜组分分离

2.2.8 蛋白的表达与纯化

2.2.9 人工脂质体的制作

2.2.10 蛋白与人工脂质体的重组

2.2.11 脂质体漂浮实验(Floatation)

2.2.12 基于FRET原理的体外膜融合实验

2.2.13 Doxyl-quenching实验

2.2.14 圆二色谱(Circular Dichroism,CD)

第三章 实验结果

第一节 MFN-ATL嵌合体的构建及细胞内定位

3.1.1 MFN1和ATL1的二级结构预测及结构域划分

3.1.2 MFN-ATL嵌合体的构建及细胞内定位

第二节 定位于内质网上的MFN-ATL嵌合体蛋白的功能检测

3.2.1 A1可以在酵母细胞中介导内质网融合

3.2.2 MFN1的CT可以发挥与ATL1的CT相似的功能

第三节 a10在MFN1介导的线粒体膜融合及其靶向定位中的作用

3.3.1 a10可以直接与膜发生相互作用

3.3.2 a10可以促进ATL介导的膜融合

3.3.3 a10可以促进MFN1介导的膜融合

3.3.4 a10对MFN1的线粒体靶向定位起重要作用

第四节 连接a7a8的loop对MFN1线粒体靶向定位的作用

第五节 MFN1促进膜融合和定位的元件在Fzo1p中的验证

第四章 讨论

参考文献

致谢

个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果

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著录项

  • 作者

    黄小芳;

  • 作者单位

    南开大学;

  • 授予单位 南开大学;
  • 学科 细胞生物学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 胡俊杰;
  • 年度 2018
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 眼科学;
  • 关键词

    穿膜区; 元件; 定位; 融合功能;

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